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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR ，条件优化
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-29 19:56:50
建议先做常规PCR，在基因组水平上进行优化！

O(∩_∩)O谢谢。。。
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11楼2012-08-01 15:26:03
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
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7楼: Originally posted by youlizujuan at 2012-07-31 20:01:10
你用的定量酶都有说明书，按那个来就行，引物浓度和退火温度在合适的范围内都能跑出来。稀释浓度按等倍稀释，比如5倍或10倍，不用分光光度计。

O(∩_∩)O谢谢。。。
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12楼2012-08-01 15:26:28
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by chenguestc at 2012-07-30 12:31:18
是的，qPCR不像普通PCR那样可以做梯度，调整一个条件就需要做一次。
我们常用到的qPCR supplies 及用量（1个反应，20ul体系）如下，楼主可根据这个用量适量调整：
TBSYBRmix                 10 ul
PrimerF (10u ...

O(∩_∩)O谢谢。。。
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13楼2012-08-01 15:26:44
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by chenguestc at 2012-07-30 12:31:18
是的，qPCR不像普通PCR那样可以做梯度，调整一个条件就需要做一次。
我们常用到的qPCR supplies 及用量（1个反应，20ul体系）如下，楼主可根据这个用量适量调整：
TBSYBRmix                 10 ul
PrimerF (10u ...

O(∩_∩)O谢谢。。。
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14楼2012-08-01 15:26:50
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