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小鼠取血和取脑提RNA
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昨天第一次尝试小鼠腹主动脉取血,预处理了EP管和留了14ul(0.1M)EDTA,但发现一次性注射器取血时有血凝现象,就改预处理注射器,处理完留了一点未知量的EDTA在注射器里,不知道确切的多少血量用多少EDTA合适。另外取血抽注射器的时候总觉得针头在血管里动,是否出血管了,不会吸到其他的腹腔液体吧?怎么保证一定是血管里的血呢,小鼠的血管不像大鼠好控制。 取血后,我用PBS心脏灌流后取脑,能得到白色的脑(没血),但灌流过程中老鼠死亡,担心取得的脑是否有RNA降解。从取血到取到脑大概20-30分钟,老鼠灌流死亡到取脑大概10分钟,RNA会降解吗。 如果同一只小鼠取血和取脑提RNA,什么方法比较好,看有人断头取血及取脑,这个方法可行? 另外取脑提RNA有什么注意事项? 怎么防止RNA酶污染?比如灌流时用冰浴PBS比较好,取脑也在冰上是否可防止RNA降解? |
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