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小鼠取血和取脑提RNA
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昨天第一次尝试小鼠腹主动脉取血，预处理了EP管和留了14ul（0.1M）EDTA，但发现一次性注射器取血时有血凝现象，就改预处理注射器，处理完留了一点未知量的EDTA在注射器里，不知道确切的多少血量用多少EDTA合适。另外取血抽注射器的时候总觉得针头在血管里动，是否出血管了，不会吸到其他的腹腔液体吧？怎么保证一定是血管里的血呢，小鼠的血管不像大鼠好控制。 取血后，我用PBS心脏灌流后取脑，能得到白色的脑（没血），但灌流过程中老鼠死亡，担心取得的脑是否有RNA降解。从取血到取到脑大概20-30分钟，老鼠灌流死亡到取脑大概10分钟，RNA会降解吗。 如果同一只小鼠取血和取脑提RNA，什么方法比较好，看有人断头取血及取脑，这个方法可行？ 另外取脑提RNA有什么注意事项？ 怎么防止RNA酶污染？比如灌流时用冰浴PBS比较好，取脑也在冰上是否可防止RNA降解？ |
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