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zhuxuejiao银虫 (小有名气)
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[求助]
走硅胶柱
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| 求助各位大神 走硅胶柱 走了一天 整个柱子基本都是黄色了 也看不出来色带 怎么接液体啊 是按什么标准接 10毫升左右接么 |
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jiangliqun
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
zhuxuejiao: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 我的柱子整个是黄颜色 看不出色带 怎么办啊 就按我摸得条件继续洗下去么 2012-07-26 10:58:18
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-07-26 10:58:54
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zhuxuejiao: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 我的柱子整个是黄颜色 看不出色带 怎么办啊 就按我摸得条件继续洗下去么 2012-07-26 10:58:18
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-07-26 10:58:54
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根据要收集的洗脱液的总量来决定接受产品时每份的接收量，假如估算收集液体量为2L（收集含有产品的色带所需要的洗脱剂的总量），每份可以是其中的十分之一量或是二十分之一根据需要，也可能是五分之一，如果是梯度每份收集的量也可以不一样。比如过柱子需要洗脱50L，每份可以在2L-5L之间调整。PS：当色带被洗脱下来后才需要分段收集。 也是大的柱子越好冲，柱子越小时间越短，就需要分的越精细， |
4楼2012-07-26 10:53:12
xj1005
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【答案】应助回帖
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zhuxuejiao: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 我的整个柱子都黄了 也看不出什么色带了 怎么办啊 2012-07-26 10:57:05
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-07-26 10:58:34
感谢参与，应助指数 +1
zhuxuejiao: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 我的整个柱子都黄了 也看不出什么色带了 怎么办啊 2012-07-26 10:57:05
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-07-26 10:58:34
| 根据你的柱子大小来的,粗分大柱(口直径大于10厘米)可以用1000毫升的接,中等柱(口直径5-10里面)的话可以用500毫升,口直接3-4里面的话一般100-150毫升的接,最小的30-50. 一般是这个范围,当然你也可以用10毫升(但这会增加劳动量),最重要的是你要通过TLC来检测里面化合物的情况 相同的组分合并就可以了,跑柱子最重要的 是流动相极性的控制 |
2楼2012-07-26 09:58:47
3楼2012-07-26 10:26:48
jiangliqun
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色带不一定是能在柱子上看到的有颜色的；对于无色物质，硅胶吸附了物质和没有吸附物质情况下透光一不一样的这也是色带；看不到但可以用荧光看到的也是色带；总之色带就是物质在层析柱上移动的现象可以用各种方法“看到”。 我们冲柱子时候（用荧光来判断，时不时的电板看看收集的是否有荧光）通常说有东西下来了，这时候就开始分段收集-----这个就是色带。 如果冲小柱子需要收集精细，多数时间短，通常从一开始就分段收集，就是为了省事。 收下的几段或是多段纯度往往不一样，最好的那部分就是要的（一般柱层析多少都会有交叉，如果没有交叉说明组份比较好分离）。 最重要的是：柱层析方法的使用往往有3个目，1.没有什么好的结晶办法，只能柱层析后析出来；2“.偷懒”---做了个东西不想摸索重结晶的方法（或是样品少弄点就够了，以后不再弄了）。3.没有其他精制办法，柱层析却是能解决问题。 根据我猜测，您的组份属于吸附比较强，极性比较小确溶解性比较差的； 常用的柱层析系统是石油醚乙酸乙酯（1:3--1:10是合适的极性，乙酸乙酯比例多了多数情况下可能就不合适了），，，二氯甲烷甲醇（1:10---1:100是合适的极性甲醇多了多数情况下也很可能不合适）；； 我以前分过蝶啶了化合物，黄色的，冲起来整个柱子都是黄色的，交叉不是很严重结合结晶办法还可行。还有种蝶啶，黄色的，溶解性很差（乙醇中难溶解，DMF中可以溶解）但是TLC只要石油醚乙酸乙酯1:10就能跑起来，整个东西上了柱子就下不来..........。 很重要一条“溶解性好的东西比较适合柱层析”，如果柱层析效果不好，回收率低，还是试着结晶的办法吧 |
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zhuxuejiao5楼2012-07-26 16:06:07