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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 重金求助原代大鼠主动脉内皮细胞培养，有经验的大侠请给予指点。
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cccssszzz08

木虫 (正式写手)

[求助] 重金求助原代大鼠主动脉内皮细胞培养，有经验的大侠请给予指点。

小弟最近在做原代大鼠主动脉内皮细胞的培养。但是再经历过多种方法尝试，牺牲大鼠十余只之后仍然是以失败告终。尝试的方法包括植块法、植环法、酶消化法（0.1%胶原酶消化2h）。但是都没有细胞出现。有参考文献，但是报道不够详细。忘有好心人能给予详细的操作步骤，或者请有亲身试验经历的大侠们现身说法。或者能给予小弟实时指导cccssszzz08@163.com

[ Last edited by cccssszzz08 on 2012-7-23 at 21:08 ]
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好好学习天天向上
1楼 2012-07-23 21:07:05
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cccssszzz08: 金币+5, ★有帮助 2012-07-24 19:04:17
你做过原代吗？可以先试试简单的组织看看能不能长出来，可能和你的操作有关系。如果连胶原酶都长不出来，可能还是操作问题。过一下细胞筛吧
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2楼2012-07-24 17:05:18
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cccssszzz08

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2012-07-24 17:05:18
你做过原代吗？可以先试试简单的组织看看能不能长出来，可能和你的操作有关系。如果连胶原酶都长不出来，可能还是操作问题。过一下细胞筛吧

我原来做过原代，做过小鼠的骨髓间充质干细胞和成骨细胞，我用酶消化的方法就是借鉴成骨细胞的原代培养方法。  但是不知道内皮为什么就这么难养~~~您原来做过内皮的原代吗？
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好好学习天天向上
3楼2012-07-24 19:05:51
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leolb

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cccssszzz08: 金币+10, ★有帮助 2012-08-13 08:26:54
我也在养血管内皮细胞，很难培养，形态老是发生变化，很让人纠结阿，提取的过程是酶消化法，必须要进谨慎，小心，你做好心理准备吧，培养细胞要像对待自己的孩子一样，这样才行，我也养过骨髓基质细胞，但内皮细胞可比BMSCS难养多了，
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leolb
4楼2012-08-13 08:05:13
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薄荷凉

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-11-21 22:59:50
cccssszzz08: 金币+10, ★有帮助, 谢谢回复，我现在已经不做这个了。以前做的时候还是消化法最好。祝你好运 2012-11-22 00:32:57
我明天也开始做了，我师兄教我们用植块法··
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5楼2012-11-21 22:01:18
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妙通生物

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cccssszzz08: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 这个俺知道 没钱买是真的 2013-01-07 15:59:55
建议使用专业的内皮细胞培养基，我以前在华师大就做内皮细胞，效果非常好
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6楼2013-01-07 12:27:35
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cccssszzz08

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2012-07-24 17:05:18
你做过原代吗？可以先试试简单的组织看看能不能长出来，可能和你的操作有关系。如果连胶原酶都长不出来，可能还是操作问题。过一下细胞筛吧

我是否可以申请退还金币？怎么申请？
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好好学习天天向上
7楼2013-10-28 09:37:38
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
cccssszzz08: 金币+5 2013-10-28 10:19:42
我用贴壁法培养过肺组织，爬出来好多细胞，只做过细胞鉴定，没有后期将内皮细胞分离出来
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8楼2013-10-28 09:47:02
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