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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

[求助] 染色体核型分析

为什么做染色体核型分析时，根尖用酸和缓冲液泡过之后切下来酶解的时候成黑色了呢？
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1楼 2012-07-23 10:54:29
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
憨憨可爱多: 金币+1, 谢谢，试试 2012-09-07 15:13:03
处理的步骤太多了我觉得，8-羟基喹啉或许有问题，参加文献：8-羟基喹啉诱导蚕豆根尖细胞异常性的研究。我常用的步骤如下，楼主可以用少量根尖试一下看。
1，剪根后，直接将根尖放入装纯净水（最好别用自来水，偏酸或偏碱，市场卖的大桶纯净水就可以）小玻璃瓶中（跟手指差不多大小的玻璃瓶，每瓶不要放太多根尖，3-5根即可），盖上盖子。放入冰水混合物里处理20-24小时。
2，取出后，倒掉瓶子里的水，把水控干净，加入固定液室温固定1天。
3，把根尖取出用酸解离或者用酶酶解后压片。
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7楼2012-08-29 20:32:00
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普通回帖

憨憨可爱多

木虫 (正式写手)
染色体核型分析时候，油镜下看的染色体比较短小，差不多都快成一个点了，怎么才能使染色体比较粗，又比较长啊，至少能看见着丝点啊，
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2楼2012-08-27 08:48:14
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

在不同的透射光下颜色是不一样的，在普通显微镜下因为光透过，有染色体部分光无法透过所以显示为黑色。
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3楼2012-08-27 09:59:21
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-27 09:59:21
在不同的透射光下颜色是不一样的，在普通显微镜下因为光透过，有染色体部分光无法透过所以显示为黑色。

只是在前面预处理的时候用酸泡了，没有镜检，根被泡黑掉了
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4楼2012-08-28 16:25:23
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

你的前处理是怎么处理的啊？从剪根到镜检是怎么处理的？一般不会泡黑了的情况啊
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5楼2012-08-28 19:33:54
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-28 19:33:54
你的前处理是怎么处理的啊？从剪根到镜检是怎么处理的？一般不会泡黑了的情况啊

剪下根尖用8-羟基喹啉处理，然后用固定液固定，固定完浸泡在70%酒精中，制片的时候取出，水浸泡，酸解10min，然后再用水浸泡，然后缓冲液浸泡10分钟，最后酶解，在酶解之前取出根尖的时候就根冠部分有黑了
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6楼2012-08-29 16:29:55
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-29 20:32:00
处理的步骤太多了我觉得，8-羟基喹啉或许有问题，参加文献：8-羟基喹啉诱导蚕豆根尖细胞异常性的研究。我常用的步骤如下，楼主可以用少量根尖试一下看。
1，剪根后，直接将根尖放入装纯净水（最好别用自来水，偏酸 ...

老师说是目前最好的方法了，我做的材料根尖超级小，比头发丝也大不了多少，难搞啊
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8楼2012-09-07 15:15:49
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皮皮5230

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 憨憨可爱多 at 2012-08-29 16:29:55
剪下根尖用8-羟基喹啉处理，然后用固定液固定，固定完浸泡在70%酒精中，制片的时候取出，水浸泡，酸解10min，然后再用水浸泡，然后缓冲液浸泡10分钟，最后酶解，在酶解之前取出根尖的时候就根冠部分有黑了...

解离一般有两种方法，一种是酸解，一种是酶解。为什么你要同时使用这两种方法呢，没尝试过一起使用，表示不理解。
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9楼2013-10-21 10:33:46
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 皮皮5230 at 2013-10-21 10:33:46
解离一般有两种方法，一种是酸解，一种是酶解。为什么你要同时使用这两种方法呢，没尝试过一起使用，表示不理解。...

酶解时间会比较长啊，酸解怕会对染色体造成损伤，我用两种结合一下，节省一些时间，效果也还不错
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10楼2013-10-21 11:40:17
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