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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC 经验高手出出主意
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独立寒秋

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC 经验高手出出主意

各位高手  我在做一个糖脂，糖脂极易溶于在二氯甲烷中，在甲醇中溶解度很小，用HPLC分析 用的是C18的反相柱，分析型， 流动相用的的乙腈 水（均含有0.1%的乙酸）梯度洗脱 具体如下啊：开始50%乙腈+50%水  30分钟后100%乙腈+0%水     30-40分钟100%乙腈   50分钟后再回到50%乙腈+50%水。由于我的样品很容易溶解在二氯甲烷中，开始用二氯甲烷进样10 -20Ul  结果发现跑的很难看，并且前几分钟就出现很难看 并且吸光度很高的鬼峰，（分析可能是二氯甲烷和乙腈水体系不互溶，导致鬼峰）后来用甲醇溶解，上样就没问题，但是问题是样品在甲醇中溶解度很小，峰很小，效果不好，(增大进样量到140ul，效果也不是很好，峰很小）我现在想让高手帮忙，帮我选一个溶剂，能与乙腈水体系互溶，同时对我的样品溶解度很好，请大家帮忙，不胜感激。定重谢！
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1楼 2012-07-22 11:31:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
独立寒秋: 金币+100, ★有帮助, 10 2012-07-22 21:01:13
你的样品在流动相中溶解度怎么样啊？如果在乙腈或乙腈-水中溶解度还可以为什么不用流动相溶解样品？（因为我看你流动相里有乙酸，会不会加大你样品的溶解度？）这样峰形会好很多的。
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2楼2012-07-22 14:20:47
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普通回帖

sally98

木虫 (正式写手)

实验不息，郁闷不止……

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的样品估计在正相溶剂里溶解度比较好，可以试试正相
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3楼2012-07-22 17:49:45
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主还是用正相条件吧 估计分离要好点
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4楼2012-07-22 19:33:57
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独立寒秋

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sally98 at 2012-07-22 17:49:45
你的样品估计在正相溶剂里溶解度比较好，可以试试正相

您的意思是用正相柱？
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5楼2012-07-22 20:59:12
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独立寒秋

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lifucheng at 2012-07-22 19:33:57
楼主还是用正相条件吧 估计分离要好点

正相条件是什么意思？用正相柱？
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6楼2012-07-22 20:59:47
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独立寒秋

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-07-22 14:20:47
你的样品在流动相中溶解度怎么样啊？如果在乙腈或乙腈-水中溶解度还可以为什么不用流动相溶解样品？（因为我看你流动相里有乙酸，会不会加大你样品的溶解度？）这样峰形会好很多的。

没试过在乙腈中，但是在甲醇中效果不好，在乙腈中效果会好吗？乙腈的极性比甲醇还大啊。
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7楼2012-07-22 21:01:04
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 独立寒秋 at 2012-07-22 20:59:47
正相条件是什么意思？用正相柱？...

是啊 用正相柱试试噻
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8楼2012-07-22 21:34:49
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浩海烟波

铁虫 (小有名气)
为什么不考虑试试用小体积二氯溶解样品后在用甲醇稀释？
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9楼2012-07-22 22:15:46
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wy511813

银虫 (小有名气)
先学习几篇糖脂的外文文献吧，这样你就不会盲目走弯路了。
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开心每一天
10楼2012-07-23 10:32:12
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