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sulakitty

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by resurgam at 2012-07-22 15:04:09
marker都跑成这样,真的跑得不太好

额 谢谢啦!  但是谁能回答我的问题啊  为什么两个marker的条带不一致,是我跑的不好的原因?
11楼2012-07-22 15:06:42
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zhangwenqing

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by sulakitty at 2012-07-22 14:07:51
这个肯定没看错,marker的条带都跑出来了,对应的大小都有...

你做胶的时候是不是没有混均匀啊!怀疑~~~
12楼2012-07-22 16:07:12
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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9楼: Originally posted by sulakitty at 2012-07-22 14:48:46
哦  歪扭可能是因为我染色和脱色的时候都煮胶了,这个跑的真的特别不好吗?...

我跑的这种应该比较正常,10个泳道各个样品都不相同,可以供分析用了。


流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2012-07-22 16:26:22
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sadc

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
供分析和发文章用的胶,最好不要煮,过夜室温脱色就好了。
本来可能就容易歪,一煮更无语了。
14楼2012-07-22 19:03:43
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sadc

木虫 (正式写手)

临走前换2次水。
15楼2012-07-22 19:04:05
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sulakitty

新虫 (小有名气)

谢谢大家的回复 可能还是我跑胶做的不好,以后染色我尽量过夜染,不煮沸了。
16楼2012-07-22 20:38:13
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by sulakitty at 2012-07-22 15:06:42
额 谢谢啦!  但是谁能回答我的问题啊  为什么两个marker的条带不一致,是我跑的不好的原因?...

不同的蛋白Marker所需的蛋白胶浓度不一样 你可以看下你的Marker所建议用的蛋白胶浓度是多少
快乐源于生活!!
17楼2012-07-23 12:01:15
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resurgam

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by sulakitty at 2012-07-22 15:06:42
额 谢谢啦!  但是谁能回答我的问题啊  为什么两个marker的条带不一致,是我跑的不好的原因?...

可能是marker本身质量不好,也可能是你跑的时候电压太大,也可能是你的电泳缓冲液过多或过少引起的微笑效应。要不你跑完了直接WB算了
18楼2012-07-23 12:43:23
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daguo0648

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你的胶浓度估计在15%左右吧,既然跑高分子,最好跑个8%-10%的胶,这样97和100会区别明显一点,同时有助于判断目标蛋白。另外你的胶跑的却实不好,MK最好不要放在边缘跑,因为会有边缘效应影响MK条带的准确位置。你把胶浓度放低,MK靠近中间孔道,重跑一块胶吧。
小小爬虫
19楼2012-07-23 16:59:45
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sulakitty

新虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by daguo0648 at 2012-07-23 16:59:45
看你的胶浓度估计在15%左右吧,既然跑高分子,最好跑个8%-10%的胶,这样97和100会区别明显一点,同时有助于判断目标蛋白。另外你的胶跑的却实不好,MK最好不要放在边缘跑,因为会有边缘效应影响MK条带的准确位置。你 ...

谢谢啦
20楼2012-07-23 20:56:07
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