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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白除盐
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jinbangming

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白除盐

各位同门，本人正在做蛋白纯化，纯化后的蛋白需要做后面的活性分析，所以要除盐（咪唑，磷酸盐和钠盐），不知道用透析的方法能不能完全除盐？如果不能我准备用超滤的方法，还有我看过在透析袋外面加入聚乙二醇，不知道聚乙二醇能不能完全将以上三种盐透析掉？请各位大侠指导指导
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1楼2012-07-20 20:55:49
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windsor2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你为什么不用脱盐柱呢？虽然处理的量少，但效果很好。
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只要功夫深铁杵磨成针
2楼2012-07-21 10:08:01
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ZEROZBT

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
懒的话用超滤吧，就是管子估计不好洗，但是效率高。
要很好的效果就要换别的什么柱的，操作麻烦也容易失误
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爱酱油爱海贼爱工作爱户外爱环保更爱自然美，大家好，我是恶魔卷发（大瓜）
3楼2012-07-21 10:28:38
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zk0604

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jinbangming: 金币+5 2012-07-23 14:02:06
首先，如果你的分子量允许的话，超滤是可以除盐的，不过你要多次加入水或你要的缓冲液。其次，透析是一个更加方便的方法，用你要的buffer透析就好了，至于透析袋外加聚乙二醇的作用是吸水浓缩，跟除盐没关系。
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4楼2012-07-21 19:24:16
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hellohedda

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jinbangming: 金币+5 2012-07-23 14:02:18
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-23 15:51:30
我也经常做蛋白纯化的，有时候分析金属离子对酶的影响需要除盐，透析袋透析除盐就可以了呀，透析液可以用不含盐离子的缓冲液，比如Tris-HCl，我一直都是这样做的，效果不错。
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5楼2012-07-21 19:37:41
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jinbangming

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by windsor2011 at 2012-07-21 10:08:01
你为什么不用脱盐柱呢？虽然处理的量少，但效果很好。

我的量很大啊
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6楼2012-07-23 13:58:31
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jinbangming

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hellohedda at 2012-07-21 19:37:41
我也经常做蛋白纯化的，有时候分析金属离子对酶的影响需要除盐，透析袋透析除盐就可以了呀，透析液可以用不含盐离子的缓冲液，比如Tris-HCl，我一直都是这样做的，效果不错。

谢谢，但是我想知道透析是否能完全除盐，我的目的是尽量出去蛋白质中的盐分，以便做后面的活性分析
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7楼2012-07-23 14:01:29
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jinbangming

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zk0604 at 2012-07-21 19:24:16
首先，如果你的分子量允许的话，超滤是可以除盐的，不过你要多次加入水或你要的缓冲液。其次，透析是一个更加方便的方法，用你要的buffer透析就好了，至于透析袋外加聚乙二醇的作用是吸水浓缩，跟除盐没关系。

非常感谢
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8楼2012-07-23 14:01:50
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by jinbangming at 2012-07-23 13:58:31
我的量很大啊...

如果量大的话可以采取切向流超滤，效果挺好，时间也ok
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9楼2012-07-23 14:17:22
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