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提RNA加氯仿后不呈乳白色 求原因
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| 提RNA加入氯仿后以前都是震荡呈乳白色的 这次用的氯仿加进去后不显乳白色 静置后有分层现象 但是是最下面略显澄清 中间层有气泡 上层为红色澄清 我以为是氯仿的问题 问别人借了氯仿加进去后还是一样 只有一个样品是和以前处理的正常样品一样 求高手解答 问题可能出在哪里啊 |
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cycici1028(金币+5): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-21 13:57:44
cycici1028(金币+5): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-21 13:57:44
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我当时是这样做的：向细胞培养瓶中加入1mLPBS，洗涤单层细胞，加入1 mlTRlzol培养，小心吹打加入1.5 mLEP管中。RT 5 min，加入0.2 mlCHCl3摇晃15 s，静置3 min。12000 g，4 ℃离心15 min。分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA），中间白色薄层（应该是蛋白和DNA），下层有机相（氯仿和蛋白等）。 你的是不是裂解时间不够？还是加入氯仿后摇动太久，静置时间不够，导致蛋白分离效果不好，中层有气泡。 |
23楼2012-07-20 17:00:30
2楼2012-07-20 15:15:59
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2012-07-20 15:32
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cycici1028(金币+5): 谢谢参与
