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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 色谱填料的筛选及制备色谱相关知识求助（菜鸟一个）
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daidai0124

木虫 (正式写手)

[求助] 色谱填料的筛选及制备色谱相关知识求助（菜鸟一个）

刚开始接触天然产物这块，目前主要做分离纯化，实验室准备搭建一个分离纯化的平台，但是本人菜鸟一个，做提取算是半路出家，好多东西都不懂，现就从最基本的填料说起，相信大家都会遇到选填料这个环节，现在的填料真是五花八门，真不知道怎么选，个人觉得选再填料之前首先特了解填料的性质、用途及价格。现就其中的一些问题向各位咨询。
1：选填料的基本流程，一般精细的填料都比较贵，1kg动不动就上万，又不可能直接哪来试，而且现在实验室又准备上一个中试规模的制备色谱 20×250的大制备柱子，这么大的制备液相柱装填一次就得0.5kg了，不知道各位是怎么筛选填料的？先上分析柱摸条件还是买个几十克回来过小的玻璃柱筛选？
2：树脂色谱填料，不知道有没有用过，有的厂家宣传过比C18好用，而且还便宜，关于树脂填料有几个疑问？我一般用的离子交换树脂和大孔吸附树脂好像都是用在玻璃柱中使用，很好说用在制备柱做制备填料来使用，而且我严重怀疑此类树脂填料能否耐高压。再有就是树脂色谱填料和一般的树脂，如大孔吸附树脂或者离子交换树脂在分离和使用性质上有什么不同之处，它们之间的价格相差多大？本人现在用的普通的大孔吸附树脂和离子交换树脂也就几十块钱一公斤，不知道色谱层析用的吸附树脂和离子交换大概要多少钱？
3：一般的硅胶，如青岛海洋的粗孔硅胶 100-200目，一般拿来过正相玻璃柱层析，对我这个物质来说分离效果还不错，就是时间有点长，个人设想能不能将其打入制备色谱中用相同的系统过中低压制备柱（可以选相对较细的，如200-300，或者更细的），理论上分离效率应该更高，不知道这个想法能不能行的通？
啰啰嗦嗦的说了这么多，可能里面有些问题让大家见笑了，但是刚开始接触这块，又没人交流，只能借助网络求助大家了。
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1楼 2012-07-18 20:18:10
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daidai0124

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Berryalnus at 2012-08-09 18:08:49
回答问题3：可以将300-400目或者硅胶H装填在中压制备色谱柱上，然后用RF值0.1的体系冲柱，分离效率比较好

谢谢，这样的话就是一般的正相系统了，目前中高压制备色谱都是用C18的反相体系。用300-400目或者硅胶H的话，常见的正相体系的溶剂系统可用吗？
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8楼2012-08-09 19:47:53
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tonypengt

木虫 (正式写手)

荒唐书生

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢提供！ 2012-08-09 18:45:50
楼主，你是要做中试级分离的话，当然选用便宜的填料要不然很烧钱！
做天化的填料很多：主要有
硅胶：正相
C8，C18：反相，死贵！大概2w元一公斤！
Sephadex LH-20：主要是虑过，效果好，就是死贵！3000左右100克！
大孔吸附树脂：分子间作用，分苷类效果可以，便宜！
MCI：日本货，类似大孔或反相，机械强度可以！也不便宜啊，刚买过北京易慧德的500ml，3000多！
聚酰胺：这个便宜，分黄酮类化合物效果显著！
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荒唐
3楼2012-07-22 09:40:52
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daidai0124

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dawei0124 at 2012-07-19 12:19:27
不懂，帮顶一下

实验室刚进了一台制备色谱，中试级别的，照你这样说反相的估计要死贵死贵了，装一次填料最少都要1kg。不知一般的正相硅胶能不能那里装柱？目前实验室有青岛海洋的粗孔硅胶200-300目的，还有一些日本富士的硅胶，之前那这些东西都是过开口的玻璃柱的。树脂之类的便宜，但是色谱级别的树脂还没有过，现在的大孔和离交型的都是过开口的玻璃柱。
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4楼2012-07-22 14:14:28
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tonypengt

木虫 (正式写手)

荒唐书生

【答案】应助回帖

中试级的制备是DAC么？
硅胶是能装的，就看柱子装的咋样喽！
反相虽然贵，但是是可以反复使用的！
对于制备机器来说，装好一根反相柱，保养好，是能长时间使用的！
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荒唐
5楼2012-07-29 09:52:22
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