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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hkxya7

金虫 (小有名气)

[求助] 菌株活化

我用的菌在斜面培养基上已经培养了接近八年的时间了，这株菌好像是一直保存在零下4度甘油中。我拿该菌划平面还有液体培养后发现该菌还是长着很好的而且长着很快。所以我想问的是该菌还需不需要进一步活化！请各位给点意见。。。。
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1楼 2012-07-14 08:49:39
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+6, MicEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-07-14 20:28:37
菌种保藏实验室大多用斜面和甘油管。一般斜面保藏方法应该1-2月活化一次，而甘油管存于-20度和-80度是可以保藏数年的。
对于菌种的活化，如果是斜面，那么平板划线或者接种液体培养基都ok。大多活化出现问题是在保藏的甘油管。因为甘油管一般多次拿出接菌，容易造成染菌。时间久也或多或少降低菌种活力，所以接种甘油管到液体培养基一般长得较平板会慢一些。
对于你的情况，个人建议因为存于4度，而且时间很久，最好用平板划线多活化几次，另外如有有抗性筛选，特异目的基因等的话，再进行抗性筛选和基因PCR。如果是大肠保存质粒或表达的，能够提质粒酶切鉴定自然是最好的。总的来说，你的菌应该多活化几次同时鉴定一下。
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5楼2012-07-14 17:51:35
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liuyl87

禁虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-14 12:50:13
本帖内容被屏蔽
2楼2012-07-14 10:49:57
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zd1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+3, 鼓励新虫交流 2012-07-14 12:52:41
不清楚你这个菌是不是需要发酵合成某种产物的？还是只是需要累积菌体？
如果是前者的话就要发酵一下看你产物的产量是否下降，或者连续传几代之后是否有产量下降的趋势，如果出现这种情况就是需要活化了，而不是简单的看菌体生长好坏。
建议每次划线分离挑取活力最高的单菌落进行活化菌种，这个对工业菌种很重要。
工业菌种的甘油管最好能保藏在-80度冰箱，如果是模式菌对产物产量没要求保藏在-20度也可以。我们实验室搞工业菌种很多，就是这么弄的。
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3楼2012-07-14 11:49:50
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Virginiaの

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想知道你确定活化出来的是你的菌么？最好先做个菌种鉴定然后再进行保存，一般4℃平板保存是一个月进行转板，-80℃保存的话时间可以是好几年。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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闲看庭前花开花落，漫随天外云卷云舒。
4楼2012-07-14 12:08:20
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