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薄冰草2011

新虫 (初入文坛)

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[交流] 玻底培养皿/板的简介及使用方法已有4人参与

如今市场上在细胞培养及观察领域又出了新的耗材——玻底皿/板，这给细胞观察带来很大便利，然而很多虫友对玻底皿/板还不是很了解，在这里我就对它们做一些下详细的介绍，希望对各位虫友有用。
•玻底皿——简介
又称玻底皿，玻底皮氏皿，玻底微孔皿，玻底灭菌培养皿，盖玻片底皿，其结构特点是在塑料平皿的圆形底部中央打出一个直径1 cm左右的圆孔并从平皿底部的外面粘上一片厚度约为0.17mm透光性极好的盖玻片以密封圆孔配有平皿盖。
使用时，将相配套的玻底皿支架放到显微镜的载物台上。再将载有样品的玻底皿放到该玻底皿支架，即可用显微镜观察样品或者用共聚焦显微镜扫描样品。
•玻底皿——用途
玻底培养皿和玻底培养板主要用于要求放大倍数高、培养器皿底面透光性能好的显微实验，如激光共聚焦显微实验、荧光显微实验和相差显微实验等。玻底培养皿和玻底培养板底面薄，透光性能好，满足了上述实验的要求。同时玻底培养皿和玻底培养板底面的小孔也减少了实验过程中抗体等试剂的使用量。
•玻底皿应用的显微镜领域一般包括：共聚焦显微镜，高分辨率显微镜，荧光成像，活细胞成像，相差显微镜，微分干涉相差显微镜，偏振光显微镜，延时摄影，视屏增强显微镜。玻底皿同时适合于GFP和显微注射技术研究结合领域。
•玻底板——简介
玻底多孔培养板与玻底皿具有相同的玻底和光学特性，允许研究者使用高批量生产，高通量筛选，珍贵试剂使用的量更少。
•玻底板——用途
常规玻底皿可以使用的大多数领域都可以使用多孔玻底板。最常应用于荧光/免疫显微镜，共聚焦，实时成像，显微注射，电子视频显微镜，相差和延时光学显微镜。
玻底板——优点
多孔玻底板的最大优势是可以在同一块板上在一致的条件下培养6,12,24,95孔培养物。多孔板适合高通量，高容量筛选领域。
利用多孔板分析是流线型的，因为只需处理一个板（相对于用多个皿来说）。
对一些领域来说，使用多孔板处理培养物变得简单化（例如：发光）多孔板的孔径更小，对于小体积的珍贵试剂来说是极其有效的。
 玻底皿兼有平皿和盖玻片的双重特点：
①其底部的盖玻片为透光性极好的光学玻璃，透光性比塑料平皿好；
②底部盖玻片厚度不大于0.17mm，适用于高倍镜观察和高质量成像；
③观察时．细胞上方有液体覆盖，不必加盖玻片，因此能够保持细胞等样品不变形，不干燥，保持其原有形态；
④可以在皿中随时加入或吸出液体，因此可以随时对细胞进行洗涤或加刺激物等处理，利于维持细胞的生长和实验操作；
⑤用倒置显微镜观察细胞时，可以盖着玻底皿盖观察，保持细胞的无菌状态，利于细胞培养：
⑥节省试剂和细胞，简化操作过程。
玻底皿/板的使用方法参考的是NEST玻底皿/板的使用方法，具体如下：
玻底培养皿和玻底培养板使用方法
1 预平衡：在玻底培养皿加入3ml培养液，在培养箱中放置15分钟。
2 加细胞：吸去培养液，在底孔中加入500ul含细胞的培养液。在培养箱中放置 2 小时，让细胞沉降贴壁。
3 加培养液：小心加入2-3ml不含细胞的培养液。该步骤用于为细胞提供足够的培养液，同时减少由于水份挥发带来的渗透压的变化。
*根据实验的要求，可以合并步骤2和3，在预平衡后直接加入2-3毫升含细胞的培养液。

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1楼 2012-07-13 16:11:41

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学艺不精

谢谢分享.

2楼2012-07-13 21:44:58

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liuzhaomin

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3楼2013-11-26 21:39:38

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不懂82

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4楼2013-11-28 18:54:37

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mylifeday

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细胞显微镜多是指倒置显微镜，主要是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微镜观察。由于使用领域的限制，被检测物体需要放置在培养皿中，就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离加长，能直接对培养皿中的被检测物体进行显微镜观察和研究，所以，物镜、聚光镜和光源都是颠倒过来的，顾名思义就是“倒置显微镜”。