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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 使用E.coli复制质粒，提取质粒产量很低
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593318518

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-07-10 19:22:18
OD不是太大问题，一般质粒随便摇都可以的。过夜的我提过，摇6个小时、10个小时的也做过，都ok。
个人认为你的问题是culture用太多了，导致加溶液2时裂解不充分，所以质粒得率低。一般用1.5mL EP管离心收集1~3次就可 ...

我的buffer 2什么的都是加倍了
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11楼2012-07-10 23:32:21
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amoeba13

新虫 (初入文坛)
24小时OD才1.5，这是你测的问题还是菌本身的活性不高？你知道超过1.0的时候要稀释了再测OD吧？
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12楼2012-07-27 16:56:35
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