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峰云弘毅

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] DNA提取

今天提的DNA加水的时候误加了pH为9、0.1mol/L的碳酸钠缓冲液,该怎么办啊,DNA还可以再用吗
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天行健,君子以自强不息
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
峰云弘毅: 金币+3, 嗯,多谢 2012-07-18 17:00:27
沉淀DNA一般用乙醇和异丙醇。其中乙醇必须在4度才能发挥沉淀核酸的作用,而异丙醇可以常温沉淀。所以,promega提基因组kit中用的沉淀是异丙醇。

另外,沉淀核酸时加入1/10体积的阳离子溶液,我们一般用醋酸钠,主要是中和带负电荷的DNA,使之能够聚集并形成沉淀。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
12楼2012-07-18 08:27:22
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
峰云弘毅: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2012-07-04 17:24:39
楼主可以试试这样,加入两倍体积无水乙醇,一倍体积的5M 的NaCl溶液沉淀DNA,提纯后用TE溶解,应该是可以再用的
风雪夜归人
2楼2012-07-04 17:06:53
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峰云弘毅

铁杆木虫 (小有名气)

NaCl溶液的作用是什么
天行健,君子以自强不息
3楼2012-07-04 17:40:38
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
峰云弘毅: 金币+10, 有帮助, 好的,谢了 2012-07-04 20:44:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by 峰云弘毅 at 2012-07-04 17:40:38
NaCl溶液的作用是什么

调整离子浓度,帮助沉淀DNA,楼主注意加入后放在-20度,45min,12000rpm离心,去上清,再用70%乙醇洗涤,晾干后用TE溶解就行了。
风雪夜归人
4楼2012-07-04 19:30:11
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