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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA提取
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峰云弘毅

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] DNA提取

今天提的DNA加水的时候误加了pH为9、0.1mol/L的碳酸钠缓冲液，该怎么办啊，DNA还可以再用吗
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天行健，君子以自强不息
1楼 2012-07-04 16:50:07
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
峰云弘毅: 金币+3, 嗯，多谢 2012-07-18 17:00:27
沉淀DNA一般用乙醇和异丙醇。其中乙醇必须在4度才能发挥沉淀核酸的作用，而异丙醇可以常温沉淀。所以，promega提基因组kit中用的沉淀是异丙醇。

另外，沉淀核酸时加入1/10体积的阳离子溶液，我们一般用醋酸钠，主要是中和带负电荷的DNA，使之能够聚集并形成沉淀。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
12楼2012-07-18 08:27:22
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
峰云弘毅: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 2012-07-04 17:24:39
楼主可以试试这样，加入两倍体积无水乙醇，一倍体积的5M 的NaCl溶液沉淀DNA,提纯后用TE溶解，应该是可以再用的
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风雪夜归人
2楼2012-07-04 17:06:53
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峰云弘毅

铁杆木虫 (小有名气)
NaCl溶液的作用是什么
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天行健，君子以自强不息
3楼2012-07-04 17:40:38
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
峰云弘毅: 金币+10, ★有帮助, 好的，谢了 2012-07-04 20:44:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by 峰云弘毅 at 2012-07-04 17:40:38
NaCl溶液的作用是什么

调整离子浓度，帮助沉淀DNA,楼主注意加入后放在-20度，45min，12000rpm离心，去上清，再用70%乙醇洗涤，晾干后用TE溶解就行了。
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风雪夜归人
4楼2012-07-04 19:30:11
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