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youthlmy

新虫 (小有名气)

[求助] 请教ODS反相硅胶柱能用乙醇冲吗？

请问ODS反相硅胶柱能用乙醇冲吗？样品在甲醇中溶解度不好，在乙醇中溶解度较好。用甲醇溶样上柱的时候样品析出了，这样接着用洗脱剂冲能达到分离效果吗？
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1楼 2012-07-03 18:13:29
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Tadalafil

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-07-04 00:23:46
youthlmy: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-23 17:07:08
有HPLC级的乙醇的。
但乙醇黏度很大，会导致柱压升高，所以一般在液相上不用乙醇做流动相。
你考虑到样品溶解性等问题，也可以用乙醇的。
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Not to advance is to go back!
3楼2012-07-03 19:08:58
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
我做的植物是种子类药材，油性大，后来发现用ODS反相硅胶效果很好，我大部分样品都是上ODS反相硅胶柱。

我的样品上柱子都是用乙醇溶解的，然后用乙醇-水梯度洗脱。主要是因为甲醇毒性比较大，我都是用乙醇来冲柱的，效果很好！

一般用乙醇溶解后，将其湿法上样，待样品进入ODS硅胶柱之后，然后用水开始洗脱，慢慢增大极性，变成10%的乙醇，然后20%的乙醇，……，一直到90%的乙醇，然后用纯乙醇冲柱子就好了！样品一点点地就出来了，然后点板合并流分即可，效果很好。

以上是我的经验，乙醇-水洗脱ODS柱很不错。希望能对你有所帮助。
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想想现在，有事可做，即是幸福~
19楼2012-07-06 11:16:35
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-07-05 11:10:20
youthlmy: 金币+5, ★有帮助 2012-07-23 17:08:19
甲醇水冲不下来？  换甲醇冲试试，还不行的话用乙腈冲，乙醇粘度大，过柱子老慢了
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10楼2012-07-03 23:00:34
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用甲醇样品都析出院，当然要换溶剂了。若乙醇可以溶解，那只需把溶剂换为乙醇，流动相还是用甲醇。
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红颜远，相思苦，几番意，难相付。十年情思百年渡，不斩相思不忍顾！
16楼2012-07-05 11:18:26
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
引用回帖:
22楼: Originally posted by 泰北之巅 at 2016-02-16 22:17:27
请问楼主，这个慢慢增大极性，是从90%的乙醇冲到纯水，还是纯水到10%，20%乙醇呢？...

ODS柱和正相硅胶柱的区别就是洗脱的时候，洗脱剂的极性是逐渐减小，即先用纯水，之后依次增加醇的比例，最后醇洗脱。
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想想现在，有事可做，即是幸福~
23楼2016-02-17 11:41:20
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普通回帖

lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-07-05 11:10:05
youthlmy: 金币+10, ★有帮助 2012-07-23 17:07:28
可以的，甚至都以走HPLC，但多数人会上来就MeOH，我很觉得奇怪
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2楼2012-07-03 18:26:30
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youthlmy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhg0209asd at 2012-07-03 18:26:30
可以的，甚至都以走HPLC，但多数人会上来就MeOH，我很觉得奇怪

我已经用甲醇溶样上柱结果样品在柱子里析出了，这样接着用洗脱剂冲能达到分离效果吗？或者还有什么补救的方法吗
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4楼2012-07-03 20:46:02
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youthlmy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Tadalafil at 2012-07-03 19:08:58
有HPLC级的乙醇的。
但乙醇黏度很大，会导致柱压升高，所以一般在液相上不用乙醇做流动相。
你考虑到样品溶解性等问题，也可以用乙醇的。

我已经用甲醇溶样上柱结果样品在柱子里析出了，这样接着用洗脱剂冲能达到分离效果吗？或者还有什么补救的方法吗
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5楼2012-07-03 20:46:34
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Tadalafil

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-07-05 11:10:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by youthlmy at 2012-07-03 20:46:34
我已经用甲醇溶样上柱结果样品在柱子里析出了，这样接着用洗脱剂冲能达到分离效果吗？或者还有什么补救的方法吗...

如果乙醇能溶解样品，不断用乙醇冲洗也许能将析出的样品溶解并洗脱。可以肯定的是，这样的话分离效果不会好，会出现拖尾等现象。
如果是分析型HPLC的话，用很慢的流速冲冲柱，甚至可以反接色谱柱，用很慢的流速，柱子另一头直接对着废液杯来冲；并且可以也可以考虑选用别的对样品溶解性好的流动相，不一定要乙醇。

劝LZ放弃已经上的样品吧。
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Not to advance is to go back!
6楼2012-07-03 21:20:52
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youthlmy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Tadalafil at 2012-07-03 21:20:52
如果乙醇能溶解样品，不断用乙醇冲洗也许能将析出的样品溶解并洗脱。可以肯定的是，这样的话分离效果不会好，会出现拖尾等现象。
如果是分析型HPLC的话，用很慢的流速冲冲柱，甚至可以反接色谱柱，用很慢的流速， ...

那可以把析出的样品都取出来，干法拌样，再上取出样品的那根柱能行吗？
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7楼2012-07-03 21:39:48
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Tadalafil

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by youthlmy at 2012-07-03 21:39:48
那可以把析出的样品都取出来，干法拌样，再上取出样品的那根柱能行吗？...

是制备而不是分析么。那就不是HPLC咯。抱歉这块不是特别熟。

那按照我以前用树脂柱的经验说吧
1. 把柱子最前端的一块连带析出的样品一起挖出来，用乙醇溶解，待用。
2. 用大量乙醇饱和色谱柱，把之前的甲醇冲走。（甚至可以重新装填）
3. 进样分析。如果是少量填料的话不会影响的吧。

没用过制备型ODS，不知道ODS是不是能如上法操作。
希望能给你帮助。
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Not to advance is to go back!
8楼2012-07-03 22:11:57
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~kane~

银虫 (正式写手)
没关系的，我以前为了保持ODS清洁，常在甲醇冲完柱后，又用乙醇冲
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？？？
9楼2012-07-03 22:23:40
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