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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE

最近做原核表达，SDS PAGE胶，分离胶30min能凝，但是浓缩胶就是不凝固，AP是新配的，原以为是浓缩胶buffer有问题，后来重配了，也调了pH值，仍然不凝固，就是鼻涕状的，不成型，粘在玻璃上，很稠，这是怎么回事啊？把配方晾出来，大家帮我看看吧，急死人了
浓缩胶：         3%
30% Acr－Bis        1.0 ml
4×浓缩胶缓冲液        2.5 ml
10% SDS                      0.1ml
1% TEMED         1ml
双蒸水                5.35ml
10% AP                     0.05
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1楼 2012-06-30 21:12:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
xiazhiwuxie: 金币+6 2012-07-01 09:17:48
浓缩胶：        5%
30% Acr－Bis        1.7 ml
4×浓缩胶缓冲液        2.5 ml
10% SDS                      0.1ml
1% TEMED         12 ul
双蒸水                5.7ml
10% AP                     0.05 ml

total 10 ml
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9楼2012-07-01 04:14:41
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clarktao

木虫之王 (文学泰斗)
★
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
网上去查查把
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10楼2012-07-01 05:57:32
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wendy3

金虫 (文坛精英)
★
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
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15楼2012-07-01 07:35:13
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小花821

金虫 (著名写手)
★
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
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17楼2012-07-01 08:04:12
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niu.bi

木虫 (文坛精英)
★
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
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18楼2012-07-01 08:12:32
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by yjchsh at 2012-07-01 04:14:41
浓缩胶：        5%
30% Acr－Bis        1.7 ml
4×浓缩胶缓冲液        2.5 ml
10% SDS                      0.1ml
1% TEMED         12 ul
双蒸水                5.7ml
10% AP                     0.0 ...

不好意思，原本想把6个金币给你的，结果不小心给了上面那个灌水的家伙
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26楼2012-07-01 09:17:01
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limeiliang

禁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-02 13:42:00
本帖内容被屏蔽
27楼2012-07-01 09:40:54
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枫叶留殇

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉TEMED不需要加那么多。。一般都是几μl
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28楼2012-07-01 11:57:18
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justdilo

木虫 (著名写手)
不懂，帮顶
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29楼2012-07-01 15:38:46
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分子生物化学

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
试一试用灯照，加速其催化作用
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30楼2012-07-01 16:51:35
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yjchsh

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by xiazhiwuxie at 2012-07-01 09:17:01
不好意思，原本想把6个金币给你的，结果不小心给了上面那个灌水的家伙...

That's fine
Good luck with your experiments!
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31楼2012-07-01 23:32:07
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zoeye

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
说不定是TEMED过期了 臭味还浓吗
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32楼2012-07-03 10:59:42
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lixiaoyu318

铜虫 (初入文坛)
ABS是不是有点少呢
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33楼2012-07-03 12:22:38
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)
谢谢各位，浓缩胶就是这样的，不成型，可以跑蛋白的
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34楼2012-07-03 16:53:36
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yxu19862楼
2012-06-30 21:28   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
yuzhiming3楼
2012-06-30 21:29   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
qingheyouyou4楼
2012-06-30 21:32   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
basa195楼
2012-06-30 21:38   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
wu208110556楼
2012-06-30 21:38   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
9108839747楼
2012-06-30 22:06   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
goingabroad8楼
2012-06-30 22:11   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
xiazhiwuxie: 金币+6 2012-07-01 09:15:46
fwjt11楼
2012-07-01 06:34   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
b72912楼
2012-07-01 07:07   回复  
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youdao113楼
2012-07-01 07:26   回复  
xiazhiwuxie(金币+1): 谢谢参与
wangyouwei14楼
2012-07-01 07:34   回复  
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郑克宁19楼
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大苹果20楼
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zhengkning21楼
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xuanzhang22楼
2012-07-01 08:55   回复  
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fcxue23楼
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hzhstar24楼
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yhtao25楼
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xutouer12335楼
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