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shiliu2011

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引用回帖:

17楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2012-06-28 21:25:49
实在做不出来就换引物吧，我也曾经P一个酶的序列老是P不出来，后来后来根据保守区域重新设计了引物一次就出来了，测序表明原来设计引物的区域有碱基变异......总共折腾了我两个月的时间..............

我p的基因是要做回补实验的,必须要包括全部基因以及启动子区域呢,这样的话就不能找保守区域设计引物了啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

鎴戜滑鎬绘槸澶繃浜庡湪涔庝竴鏃剁殑寰楀け锛屽?村繕璁颁簡鎴?闀挎�?鏄渶閲?瑕?鐨�

21楼2012-07-01 11:38:19

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shiliu2011

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引用回帖:

17楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2012-06-28 21:25:49
实在做不出来就换引物吧，我也曾经P一个酶的序列老是P不出来，后来后来根据保守区域重新设计了引物一次就出来了，测序表明原来设计引物的区域有碱基变异......总共折腾了我两个月的时间..............

再请教一下,如果单纯的想验证自己研究的细菌里有没有某个基因,P的时候引物该怎样设计?(根据文献上的引物p不出来啊)

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22楼2012-07-01 11:44:50

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liuyu_sdili

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看天: 金币+3, 鼓励交流 2012-07-02 21:05:40

引用回帖:

22楼: Originally posted by shiliu2011 at 2012-07-01 11:44:50
再请教一下,如果单纯的想验证自己研究的细菌里有没有某个基因,P的时候引物该怎样设计?(根据文献上的引物p不出来啊)
...

不是太清楚，谈一点自己的看法：你想验证的基因知道序列吗？如果知道的话重新设计一个就好了，P完后测序比对就知道是不是那个基因了~~~

23楼2012-07-02 17:41:20

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shiliu2011

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23楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2012-07-02 17:41:20
不是太清楚，谈一点自己的看法：你想验证的基因知道序列吗？如果知道的话重新设计一个就好了，P完后测序比对就知道是不是那个基因了~~~...

谢谢

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24楼2012-07-02 21:00:32

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云淡风轻win

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同楼主，我也p不出来！

25楼2012-07-02 22:36:42

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风雨山林

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锻炼内心，我一个月了，还没出来

26楼2012-12-09 17:35:33

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渭水凡夫

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头大得很啊

平静的水和不叫的狗是最可怕的

27楼2013-03-29 12:39:01

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听雨轩1314

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再查查退火温度，还有循环数对不对哈，加油，

不忘初心

28楼2013-06-21 12:31:30

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dcb005

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生物实验就是这样的，别气馁，找找原因是不是模板和引物的事情

★穷则独善其身,达则兼济天下★

29楼2013-06-22 12:10:52

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rv1nm2y

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第一次做PCR，全部东西都是老师给好的，扩增效果没的说。。。
自己从来没有自己独立设计一次，冷汗冒起。

30楼2013-06-23 19:01:23

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