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renruntan

禁虫 (著名写手)

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悬崖边的哭泣

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

文献中的肝脏组织样品是要先放到匀质buffer里面进行处理,最后获得肝脏中的蛋白,这个匀质buffer配方为: 8M urea, 4% CHAPS (w/v), 65mM DTT, 1mM EDTA, 0.5mM EGTA,1mM PMSF,0.2mM Na3VO4, 1mM NaF,40mMTris-HCl at pH 7.4。直接点说,上述复杂的化学试剂用Tris-HCl缓冲液配制,最后pH调为7.4。或者可以把上述所有的化学试剂包括Tris碱先称好固体粉末,最后加水溶解,之后调节pH即可,当然,某些试剂若不方便称取固体,则可先配成高浓度母液进行稀释。
reducing solution (6M guanidine hydrochloride, 100mM ammonium bicarbonate, pH 8.3这段中的盐酸胍是位于碳酸氢铵缓冲液中的,你可以先称好碳酸氢铵,少放一点水溶解,之后将称好的盐酸胍放进去溶解,最后调pH并定容。也可以将盐酸胍用碳酸氢铵缓冲液溶解。最后的那个DTT和IAA可以用水溶也可以用前面的100mM碳酸氢铵溶解。用水溶解的话可以配个高浓度的,稀释加到前面的缓冲液中,使终浓度为要求值即可。
希望对你有帮助哈,第一次在小木虫上回帖。能不能给金币我呀!
3楼2014-06-13 16:45:57
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lintaosong

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是用你所要选用的缓冲液配制的,比如我实验用HEPES缓冲液就用HEPES去配制上述的溶液;如果没有特定的缓冲液,就用水配制。关键是根据自己实验的需求。
看你上述的文字,关键有几点:所配制溶液的pH,这个要特别注意;配制用到的溶剂根据自己实验的需求选择,如果没要求一般都用H20配制,
2楼2012-09-02 12:07:37
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