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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 硅胶柱可否一直使用？
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472263516

新虫 (小有名气)

[求助] 硅胶柱可否一直使用？

我需要将油脂分为中性脂肪和糖脂和磷脂，洗脱溶剂分别为氯仿，丙酮和甲醇。
请问：1、装好一个45*600的硅胶柱（60-100目）后，我是将油是直接倒入柱子然后洗脱还是将先将油溶解在氯仿里，然后洗脱？如果溶解在氯仿里比例是多少？
          2、每一次油上样量大概多少？用多少溶剂才能洗脱完全？
          3、因为磷脂含量极低，我需要一定的量，一次洗脱的量可能不够，是否可以用同一根柱子不换硅胶第二次甚至第三次加样洗脱回收？
         谢谢！
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1楼 2012-06-13 15:23:04
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472263516

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by reasong at 2012-06-14 10:21:53
1将油用少量溶剂溶解，再用溶剂洗脱2需要自己试验，可以做个淋洗曲线3多次加样可能会导致饱和，该保留的物质保留不住。

感谢帮助，我还有几个问题，希望能得到你的帮助。
我的目的是将提取的油分为中性脂肪和极性脂肪，中性脂肪用氯仿洗脱，极性用甲醇洗脱，分别回收后下一步试验。
1你建议油用少量氯仿溶解？少量是多少，大概比例多少？
2什么时候上样？是洗脱液离硅胶面1-2cm高时还是洗脱液刚好完全进入液面时上样？
3我看到有人建议说为了不把柱子表面冲坏，建议在表层加无水硫酸钠或者海沙，那么请问什么时候加，怎么加，加的时候难道不怕把柱子冲坏吗？加的高度是多少？
4最头疼的一个问题是如何判断中性脂肪或者极性脂肪已经完全被洗脱下来了？做TLC需要标样吧，可是中性脂肪和极性脂肪是个混合物。
期待回复！
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4楼2012-06-15 17:12:17
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llrock926

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-13 21:51:32
472263516: 金币+2 2012-06-15 17:14:46
没分过中性油和磷脂、糖脂，不过给你点建议，油最好溶解到溶剂里，然后用非极性溶剂把中性油洗脱出来，然后换极性不同的溶剂再把糖脂和磷脂洗脱出来。具体什么溶剂你可以查查文献，或者求助做过这个项目的人。
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2楼2012-06-13 17:34:20
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reasong

木虫 (小有名气)

科研小丑

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
472263516: 金币+8, ★有帮助 2012-06-15 17:14:40
1将油用少量溶剂溶解，再用溶剂洗脱2需要自己试验，可以做个淋洗曲线3多次加样可能会导致饱和，该保留的物质保留不住。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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过去的过去，未来的未来，把握现在。。。。
3楼2012-06-14 10:21:53
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常晨晖

金虫 (初入文坛)
请问各位大虾，把磷脂从糖脂、中性脂混合物里分离出来用的硅胶柱是正相还是反相，我想直接用商品柱但是种类太多了，不知道用哪个
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5楼2013-06-27 07:50:55
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