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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » DEAE-52纤维素柱求助
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52纤维素柱求助 已有2人参与

现在在做食用菌子实体多糖的分离纯化，我用的是DEAE-52的纤维素柱，用0.05到0.5的NaCl 梯度洗脱，1.25ml/min，上样量是1mg/ml 的多糖10ml，每管收集5ml，过了两次，也有峰，但是纯品太少，没办法富集，还想拿到纯品，怎么办呢？
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1楼 2012-06-13 10:09:29
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小蒋

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议你每管收集10ml，每10分钟做一个点，先确定浓度高的时间段，几个不同组分时间段可能不同，把对应的时间段的收集液聚集在一起，在旋蒸浓缩，再不同组分分开，多次过柱，但是光光用DEAE-52的纤维素柱这种离子交换柱来分析你这种天然产物，分析效果不会很好的，一些相似的成分是分不开的，我做竹叶多糖的分离时，在使用离子交换柱后，还要过Sepharose柱，分离效果就很好了，只要分离次数控制得好，相似度很高的成分也能分开，就是Sepharose填料很贵。
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我想我会的。
14楼2013-05-28 17:49:43
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

guoyongyue
太胖了！~
3楼2012-06-13 21:27:50
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsd3521 at 2012-06-13 21:27:50
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱

好像不行~
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4楼2012-06-13 21:52:31
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zhh8672

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoyongyue: 金币+10, ★★★很有帮助, 有帮助 2012-06-15 11:29:45
有几个峰呢？建议从水开始，慢慢的把盐离子浓度增大，一般DEAE收集的组分可以将峰两边一起收集，只用这个填料很难得到高纯度的样品，还需要进一步的分离
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5楼2012-06-15 08:57:06
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