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guoyongyue

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52纤维素柱求助已有2人参与

现在在做食用菌子实体多糖的分离纯化,我用的是DEAE-52的纤维素柱,用0.05到0.5的NaCl 梯度洗脱,1.25ml/min,上样量是1mg/ml 的多糖10ml,每管收集5ml,过了两次,也有峰,但是纯品太少,没办法富集,还想拿到纯品,怎么办呢?
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小蒋

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议你每管收集10ml,每10分钟做一个点,先确定浓度高的时间段,几个不同组分时间段可能不同,把对应的时间段的收集液聚集在一起,在旋蒸浓缩,再不同组分分开,多次过柱,但是光光用DEAE-52的纤维素柱这种离子交换柱来分析你这种天然产物,分析效果不会很好的,一些相似的成分是分不开的,我做竹叶多糖的分离时,在使用离子交换柱后,还要过Sepharose柱,分离效果就很好了,只要分离次数控制得好,相似度很高的成分也能分开,就是Sepharose填料很贵。
我想我会的。
14楼2013-05-28 17:49:43
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

非应助,自己也是在学习中,DE52不耐压,如果加大盐离子浓度可以不?不梯度洗脱,直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱

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太胖了!~
3楼2012-06-13 21:27:50
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsd3521 at 2012-06-13 21:27:50
非应助,自己也是在学习中,DE52不耐压,如果加大盐离子浓度可以不?不梯度洗脱,直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱

好像不行~
4楼2012-06-13 21:52:31
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zhh8672

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guoyongyue: 金币+10, ★★★很有帮助, 有帮助 2012-06-15 11:29:45
有几个峰呢?建议从水开始,慢慢的把盐离子浓度增大,一般DEAE收集的组分可以将峰两边一起收集,只用这个填料很难得到高纯度的样品,还需要进一步的分离
5楼2012-06-15 08:57:06
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