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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 做PCR加taq酶时忘记换枪头了，酶还能用吗？
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504775490

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只用做单一的实验还是可以用滴，不必告诉导师的，这管酶最好就是你自己用吧，别给别人用了，没什么事的，不必太担心，第一次做难免会出问题，以后注意就好！
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11楼2012-06-06 21:02:10
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863063670

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zgb1982 at 2012-06-06 14:24:58
导师不会知道的，这种事没必要汇报。自己扩增缺失不同组分验证一下吧，或者以后你只扩这对引物和模板时用这个，再换新的扩其他的

导师只拿出一管酶给我，前两天刚拿的，做所有的pcr 都用这一管，我没法儿换啊……悲剧了！！如果做个验证实验验证一下是不是就没有问题？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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12楼2012-06-07 07:12:52
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863063670

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by roomofxw at 2012-06-06 14:39:13
首先现在PCR酶多便宜，换掉最合适
如果这酶只是你做单一实验用的话，那也没事，接着做就是了
其他人要用的话，那最好还是告诉他们一声，省得浪费别人功夫。

要不往酶里加点核酸酶？把模版引物降解后， ...

加热失活？？？哦卖嘎，我导师会把我送去十八层地狱的……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2012-06-07 07:15:25
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
也不至于吧,一管酶而已,也就几百块吧,整天这么害怕自己出钱买一支算了
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14楼2012-06-07 09:50:20
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涌动的泉

铜虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by 863063670 at 2012-06-07 07:15:25
加热失活？？？哦卖嘎，我导师会把我送去十八层地狱的……
...

其实他说的是加热到70-80度使核酸酶失活，taq酶可以耐高温的吧
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我们的过去，成就了如今的我们，无需悔恨
15楼2012-06-08 09:19:34
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sarah_lz

金虫 (小有名气)
这个对其他人的实验肯定有影响的，核酸酶在taq的保存液里不一定有用，还是老实招了吧
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16楼2012-06-08 09:31:17
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wcg129

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 个人认为楼主的这个方法很强大 2012-06-08 14:08:21
本帖内容被屏蔽
17楼2012-06-08 11:23:17
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议你用这哥酶做一个阴性对照看看，如果阴性对照没问题，没有条带就不必担心。如果阴性对照出现了微弱的条带就不能用了，说明被污染了。
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18楼2012-06-09 19:11:32
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会交叉污染的，你可以做个小试验，看看是否污染的很厉害
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事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
19楼2012-08-06 18:28:47
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zhoubin0823

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没有多大影响的，退一步来说这么点引物与模板即使在合适的条件下pcr也扩增不了多少，只要别人pcr的目的条带与你pcr的目的条带不是很接近，核酸收胶也能分辨的出来，只是让做的人知道可能有这方面的影响。
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20楼2015-01-05 15:13:29
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