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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 实验结果与一道考试题撞车!求解答 已有6人参与

记得有一道考试题:启动子中发现一段重复序列,请设计实验证明此重复序列具有增强子的功能。

最近克隆了一个基因,发现在突变体中此基因表达量非常高,测序其启动子后发现启动子转录位点上游 -66bp开始的一段214bp的序列重复了一次,变成串联的俩拷贝,现在怀疑这两个拷贝形成了一个强的增强子,请问我该怎么证明他?
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AnaSequence

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
在报告基因质粒上游插入可疑启动子,然后做一系列缺失载体,分别转进去看表达水平,包括缺失目的片段的。
4楼2012-06-02 17:36:42
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j2

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
克隆一段少了这个疑似“增强子”的基因,比较这2个基因的表达量呢
修炼ing,当虫仙……
2楼2012-06-01 21:53:41
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
突变突变突变突变突变突变突变突变~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
Let God do with it as He wills
3楼2012-06-01 23:51:42
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bst5

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
把你认为的增强子克隆出来,连接到pGL3载体中,测定荧光素酶活性啊,就可以判断到底有没有增强的效果了
6楼2012-06-05 11:02:25
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