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HPLC分离分析多肽
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| 我是第一次接触HPLC，要分离分析的多肽分子量是4000多，用PBS溶解的，主要是想看溶解后团聚了没有，应该用什么作为流动相呢？还有就是用什么色谱柱呢？望高手指教。 |
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xbqewpq
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魂兮
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【答案】应助回帖
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lihongyan424: 金币+1, 感谢应助。辛苦 2012-05-30 16:08:45
奇观在险峰: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2012-05-31 10:28:43
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此方法仅作参考！！！ 初始分离条件 色谱柱： SB-C8 4.6x150 mm，3.5或5µm 流动相： A： 95% H2O:5% ACN（含有0.1%TFA） B： 5% H2O:95% ACN（含有0.085% TFA） 梯度： 60分钟内 0 – 60% B 柱温： 35 - 40ºC 流速： 1 mL/min 选择溶解肽类的溶剂 水/磷酸盐缓冲液最弱 稀酸（三氟乙酸、乙酸或盐酸） pH 中性， 6-8 M 盐酸胍或异硫氰酸盐到 5% 醋酸/6M 脲 稀酸 + 水/有机溶剂(乙腈、甲醇、四氢呋喃、异丙醇) 稀碱 (氢氧化铵) 二甲基亚砜或0.1%-1% 三氟乙酸的二甲基亚砜 最强 甲酰胺 |
2楼2012-05-30 15:57:00