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Janual

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

10楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-05-31 01:04:41
那么你是用哪种方法提的呢？我只知道质粒小提的加溶液1、2、3的方法。不过估计原理都差不多。其实，我有点看不太明白你的实验步骤...你用异丙醇沉淀后先干燥再用乙醇洗涤？用乙醇洗涤时方法不对的话是会溶解DNA的， ...

我的方法是：分子生物学克隆指南那本书里的碱裂解中量制备法，里面加异丙醇沉淀，离心后，要去除异丙醇。我以为就是要干燥了。是不是错了？
70%乙醇洗的方法是颠倒几次。
你说加盐，是哪种呢?加完后要振荡吗？

谢谢！

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11楼2012-05-31 09:48:34

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XOooZzz

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

我没有看过中量制备法的实验步骤。不过照理，异丙醇沉淀后只要倒掉上清就可以了，完全不需要干燥。加乙醇清洗时如果你怕洗不净，可以浸泡个半小时或几小时。如果你的DNA不幸溶解了，加点食盐就可以，或者醋酸钠也行，使盐的终浓度大约0.3M（要做的严谨一点的话，是加入1/10体积的pH8.0的3M醋酸钠，注意要保持乙醇的浓度），颠倒几下离心就ok了。

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12楼2012-05-31 10:46:31

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