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Janual

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-05-31 01:04:41
那么你是用哪种方法提的呢?我只知道质粒小提的加溶液1、2、3的方法。不过估计原理都差不多。其实,我有点看不太明白你的实验步骤...你用异丙醇沉淀后先干燥再用乙醇洗涤?用乙醇洗涤时方法不对的话是会溶解DNA的, ...

我的方法是:分子生物学克隆指南那本书里的碱裂解中量制备法,里面加异丙醇沉淀,离心后,要去除异丙醇。我以为就是要干燥了。是不是错了?
70%乙醇洗的方法是颠倒几次。
你说加盐,是哪种呢?加完后要振荡吗?

谢谢!
11楼2012-05-31 09:48:34
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XOooZzz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我没有看过中量制备法的实验步骤。不过照理,异丙醇沉淀后只要倒掉上清就可以了,完全不需要干燥。加乙醇清洗时如果你怕洗不净,可以浸泡个半小时或几小时。如果你的DNA不幸溶解了,加点食盐就可以,或者醋酸钠也行,使盐的终浓度大约0.3M(要做的严谨一点的话,是加入1/10体积的pH8.0的3M醋酸钠,注意要保持乙醇的浓度),颠倒几下离心就ok了。
12楼2012-05-31 10:46:31
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