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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC测定的样品，pH值应该在什么范围？
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家在石家庄

新虫 (小有名气)
★
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-06-21 09:02:27
我也测定脑组织的单胺类神经递质，组织用0.1M HClO4沉淀蛋白后直接进样，可是标准品却用水作母液，然后用流动相稀释到一定浓度，测得单标的出峰时间和混标的出峰时间不一样，基本上混标的出峰时间前移。样品的出峰时间就更乱了，根本没法定位，这是怎么回事呢？请大家帮忙出出主意吧，谢谢！！！
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11楼2012-06-02 19:29:44
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wangyuanji

银虫 (小有名气)
对照品也直接用0.1M HClO4溶解吧！不用用流动相稀释，直接用0.1M HClO4稀释，这样能够保证样品和对照品溶剂相同，保留时间应该能够一致。你试试看。
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心态比能力重要
12楼2012-06-04 16:59:22
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eskimo_yan

银虫 (初入文坛)
我的标准品也是用0.1M的高氯酸溶解的，但是标准品出峰和样品出峰时间对不上，我是用高效液相荧光色谱法来检测的，脑样只出了4个峰，还不能定性，我都快疯了，希望有高手指点一下。
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13楼2012-06-20 08:44:34
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wangyuanji

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by eskimo_yan at 2012-06-20 08:44:34
我的标准品也是用0.1M的高氯酸溶解的，但是标准品出峰和样品出峰时间对不上，我是用高效液相荧光色谱法来检测的，脑样只出了4个峰，还不能定性，我都快疯了，希望有高手指点一下。

好好优化一下色谱条件，估计你的条件还不稳定。你把脑样处理得太干净了吧？才四个峰。
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心态比能力重要
14楼2012-06-20 16:48:04
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鱼爱哈根达斯

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-06-21 09:02:45
这个要根据不同的色谱柱来看。楼主我觉得你的表述是不是不太准确呢？现在的色谱技术很赞，可以测定很广范围的样品。一般的思路是，先查一下样品的极性和pH，选用合适的色谱柱，然后摸索条件等等。
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脚踏实地
15楼2012-06-20 22:55:06
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
leecius: 金币+1, 谢谢！ 2012-06-21 09:02:50
1、一般色谱柱pH耐受范围是2~8
2、特殊键合作用的色谱柱，耐受范围可以更广，可耐酸或耐碱
3、样品pH低或高，如果再经流动相稀释处理，再进样，pH会发生变化，不代表一定对色谱柱有很大影响。
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守候在风中的宁静。
16楼2012-06-21 08:19:18
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ggk1218

至尊木虫 (著名写手)
楼主，小弟最近也想做脑内神经递质，不知道有好的分析方法没有？
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17楼2013-03-02 14:40:24
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452243419

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 多谢指教！ 2013-03-03 11:15:02
这要看你的色谱柱的耐受能力了，一般的柱子是ph2~10，ph高于10或者低于2对仪器和柱子都不好，楼主再优化优化色谱条件
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18楼2013-03-02 18:20:04
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