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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 关于动物细胞体外培养的问题
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yeedro

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 关于动物细胞体外培养的问题

之前发过帖子询问过，有两个回复帖子就没人理了，可是问题没问完，只好重开一个帖子了。
    之前的问题是“细胞干了之后多久死亡？”这里主要说的是哺乳动物的细胞，比如人的白细胞。有大虾回答“一般了干了几小时，再加培养基，细胞也可以活的。但只要干了几分钟，对细胞就会有影响，哺乳动物的细胞没有细胞壁，所以维持渗透压很重要的，对细胞的性状会有影响的。”。
    于是我又有问题了，那过多久细胞彻底没救呢？十几个小时？几十个小时？能具体些吗？
    还有，干几分钟对细胞就会有影响，那会有些什么影响呢？
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1楼 2012-05-18 13:48:56
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神经再生

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先对于楼上的争议表达自己的见解：细胞培养是需要氧气的，要满足基本的呼吸作用，肯定都是有氧呼吸了。产生误解的原因可能是5%的二氧化碳，它的作用只是为了保持培养基缓冲系统维持一定的PH值，这个对于细胞的生存是必须的。所以与空气接触一说，个人认为是无稽之谈。
其次，细胞表面并不是光滑的，在细胞培养一段时间后，会有细胞外基质的出现，这些特殊的物质会有一定的固水性，在换液等操作短时间的暴露应该问题不大，当然越迅速越好。如果不可避免长时间的暴露，建议将超净台的风速调小或者直接关掉。
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也许似乎大概是，然而未必不见得。
4楼2012-05-19 17:20:00
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking: 金币+4, BioEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-18 19:53:16
我个人认为：
1、细胞暴露与空气中，O2对他伤害较大，因为细胞培养是需要厌氧环境的。
2、至于干，一般倒液后都会有残留，还是能维持一段时间的，但液面会很低，此时细胞外的缓冲液由于变少缓冲能力下降，pH多少应该也会发生变化，会对细胞不利。

至于影响有多大，要看你要检测的东西是什么？
我见过有专做酸度轻微改变对肿瘤细胞的影响的
有做O2损伤的

如果你还有细胞就重新复一个。如果只是感性趣讨论，无所谓，个人个观点或是去找文献找证据。   如果是按protocol做实验，这做的有点问题，最好是重做，有些时候问题可能不能即可体现出来，但万一做了很久才出来，那就来不及了。
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-05-18 14:46:15
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-18 19:53:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-05-18 14:46:15:
我个人认为：
1、细胞暴露与空气中，O2对他伤害较大，因为细胞培养是需要厌氧环境的。
2、至于干，一般倒液后都会有残留，还是能维持一段时间的，但液面会很低，此时细胞外的缓冲液由于变少缓冲能力下降，pH多少 ...

首先细胞生长氧气是必须的！！这点毋庸置疑。

让细胞干掉这样的实验没有做过。但肯定会对细胞有损伤的。做个简单的实验即可！设置几个实验组，OK！
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3楼2012-05-18 17:05:15
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 谢谢应助 2012-05-21 12:42:10
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-05-18 14:46:15:
我个人认为：
1、细胞暴露与空气中，O2对他伤害较大，因为细胞培养是需要厌氧环境的。
2、至于干，一般倒液后都会有残留，还是能维持一段时间的，但液面会很低，此时细胞外的缓冲液由于变少缓冲能力下降，pH多少 ...

个人也不太同意你的观点，大部分动物细胞是需要氧气的！如果将瓶口盖严一天后果也是很严重的，CO2主要是调节PH值的。楼主要真想知道的话，可以做几个对照，自己摸索下！主要影响还在渗透压下！这位大侠！PH影响不大，细胞液吸出后，一会就干了！觉得你的回答不太靠谱！
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5楼2012-05-21 10:57:07
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