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yuzhen719

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sdneirf198: 金币+2, ★★★★★最佳答案, 谢谢,我要分的东西在流动相里的溶解性还算好。 2012-05-17 14:35:23
这也可能与样品的溶解性有关,可能你的样品在此洗脱剂里的溶解性不好
11楼2012-05-17 11:07:16
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sunny圣晟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sdneirf198: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 非常感谢。 2012-05-17 14:39:40
引用回帖:
7楼: Originally posted by sdneirf198 at 2012-05-16 16:28:47:
里面的东西的含量大概是多少我知道,所以基本上可以确定是东西没有冲出来。我现在正用你说的第二种方法用甲醇冲看里面到底还有没有。但是如果真是没有冲出来,为什么第二个东西竟然在第一个没有冲完的情况下也出 ...

你现在用TLC再摸下条件,一般来说,你要摸到一个让你的rf值大约在0.3-0.5之间的条件最佳,你的洗脱剂极性还是不太够。应该适当梯度提高极性。你的硅胶柱有多高?第二个物质在第一个物质没有出来完全的情况下就出来了,你要想想可能:第一,你的硅胶柱太短了,没有让他们完全分离开。第二:你的流速太快了。当然你要看这两个物质在液相上面出来的时间有没有差很多,如果没有差很多确实会出现交叉的情况。需要反复上柱子。
12楼2012-05-17 12:48:27
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sdneirf198

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by sunny圣晟 at 2012-05-17 12:48:27:
你现在用TLC再摸下条件,一般来说,你要摸到一个让你的rf值大约在0.3-0.5之间的条件最佳,你的洗脱剂极性还是不太够。应该适当梯度提高极性。你的硅胶柱有多高?第二个物质在第一个物质没有出来完全的情况下就出 ...

谢谢,启发非常大。
13楼2012-05-17 14:35:42
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sdneirf198

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by sunny圣晟 at 2012-05-17 12:48:27:
你现在用TLC再摸下条件,一般来说,你要摸到一个让你的rf值大约在0.3-0.5之间的条件最佳,你的洗脱剂极性还是不太够。应该适当梯度提高极性。你的硅胶柱有多高?第二个物质在第一个物质没有出来完全的情况下就出 ...

我想问一下,我用的是干法上柱,干法上样,这样会不会使样品容易吸附呢。上完柱后先用流动相洗一洗再上样品会好一点吗,还是直接湿法上样会更好呢?
14楼2012-05-17 14:41:30
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

引用回帖:
10楼: Originally posted by anyluk at 2012-05-17 11:06:32:
不知道你用的是什么柱子,或许死吸附严重,没能洗脱下来,换大极性的如何?

就是最好不要中此类柱子洗脱
精益求精
15楼2012-05-17 14:44:39
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sunny圣晟

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by sdneirf198 at 2012-05-17 14:35:42:
谢谢,启发非常大。

干法和湿法实际上是没有很大的区别(我导师这么跟我说的),但是干法一般水平是很难操作的,都是有经验的老师才会用的,因为干法装柱子容易没有压实,然后你的样品一上,溶剂一冲,会发现东西下来的不均匀,看下来的溶剂的状态一般都是呈锯齿状的,而不是均匀的一个环一个环,所以还是建议用湿法装柱子,干法上样。
16楼2012-05-17 17:52:08
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

柱子有吸附
17楼2012-05-18 10:06:03
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sdneirf198

金虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by zw0123456789zw at 2012-05-18 10:06:03:
柱子有吸附

那怎么减少吸附呢
18楼2012-05-18 13:29:52
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

引用回帖:
18楼: Originally posted by sdneirf198 at 2012-05-18 13:29:52:
那怎么减少吸附呢

甲醇冲洗得到的得率也比较低,那就没办法了。或者有可能你要的成分是否不稳定呢。
19楼2012-05-18 13:57:13
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bordyfan

木虫 (著名写手)

pupil

反应的产率很高,就是挂在柱子上的比较多吗?也不出现交叉?样品在柱子上的溶解度怎么样?样品的酸碱性怎样?看看这些问题,选择适合的条件再试试看吧,我做的反应产率极低,都不想分柱子。
我所荒废之今日,正是昨日殒身之士渴求的明日。
20楼2012-05-18 21:23:08
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