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cuiyoutian88

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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baby1_9253344: 金币+4, ★★★很有帮助, 就是需要您这样的经验之谈 2012-05-13 10:43:25

我是在破碎时候就加入千分之0.5的dtt,然后最后透析..

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11楼2012-05-13 10:40:36

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baby1_9253344

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引用回帖:

11楼: Originally posted by cuiyoutian88 at 2012-05-13 10:40:36:
我是在破碎时候就加入千分之0.5的dtt,然后最后透析..

我还想请教一下，透析之后，巯基不就没有东西保护了吗？这个时候怎么办？换还原剂吗？还是更改pH？
如果蛋白透析之后马上冻干，会不会在冻干过程再还原？

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12楼2012-05-13 10:44:49

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tiandizao

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8楼: Originally posted by baby1_9253344 at 2012-05-10 16:48:01
请问~这个还原剂的浓度大概多大合适呢？就是多大浓度才能起到还原作用呢？太大了的话是不是会不可逆变性啊？

另，
文献中我这类蛋白他们用的是肝素亲和柱纯化的，洗脱剂都是含巯基乙醇的，不晓得是什么tag。我 ...

没必要在专业上把自己限至死了，应该学会变通，换一个tag并没有你想的那么难

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不断的修正问题，改正错误中走向永恒