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cuiyoutian88

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
baby1_9253344: 金币+4, ★★★很有帮助, 就是需要您这样的经验之谈 2012-05-13 10:43:25
我是在破碎时候就加入千分之0.5的dtt,然后最后透析..
11楼2012-05-13 10:40:36
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by cuiyoutian88 at 2012-05-13 10:40:36:
我是在破碎时候就加入千分之0.5的dtt,然后最后透析..

我还想请教一下,透析之后,巯基不就没有东西保护了吗?这个时候怎么办?换还原剂吗?还是更改pH?
如果蛋白透析之后马上冻干,会不会在冻干过程再还原?
12楼2012-05-13 10:44:49
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tiandizao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by baby1_9253344 at 2012-05-10 16:48:01
请问~这个还原剂的浓度大概多大合适呢?就是多大浓度才能起到还原作用呢?太大了的话是不是会不可逆变性啊?

另,
文献中我这类蛋白他们用的是肝素亲和柱纯化的,洗脱剂都是含巯基乙醇的,不晓得是什么tag。我 ...

没必要在专业上把自己限至死了,应该学会变通,换一个tag并没有你想的那么难
不断的修正问题,改正错误中走向永恒
13楼2012-07-13 15:18:38
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edoz1986

新虫 (小有名气)

镍柱可以接受2mm一下dtt浓度。如果你有钱的话可以用tcep,它对柱子没有影响。
14楼2013-05-23 10:05:29
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)

15楼2013-05-29 10:08:45
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