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hellolin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-06 21:35:04:
做了nest pcr,得到了单一条带，可是太小了，还不到500bp，根据基因比对结果，感觉应该是1000多bp的。是不是错配！还是什么东西？

你可以用引物验证一下一轮有没有扩出你的目的基因，然后在接着做nest pcr。如果一轮产物有你的目的基因的话可以试着延长一下延伸时间。3‘RACE的话后面的UTR可能会比你预期的长
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scienceguy
11楼2012-05-07 18:38:28
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XOooZzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-07 17:13:48:
做了inner primer了！怎么用单引物做对照，是用inner primer吗?

就是分别只加正向引物和只加反向引物做次pcr看看，以防你的那个条带只不过是单引物扩增。
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12楼2012-05-07 23:22:23
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by XOooZzz at 2012-05-07 23:22:23:
就是分别只加正向引物和只加反向引物做次pcr看看，以防你的那个条带只不过是单引物扩增。

谢谢仁兄相助！
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勤能补拙
13楼2012-05-08 09:51:47
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yiyi12

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-07 17:13:48:
做了inner primer了！怎么用单引物做对照，是用inner primer吗?

我一直没搞明白什么是 单引物扩增？ 能否告知一下？多谢啦~~
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14楼2012-05-08 10:41:57
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by yiyi12 at 2012-05-08 10:41:57:
我一直没搞明白什么是 单引物扩增？ 能否告知一下？多谢啦~~

好像就是只用outer primer  或是 inner primer做引物的扩增吧！
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勤能补拙
15楼2012-05-08 10:47:26
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