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晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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weining1203: 金币+2, 有帮助, 谢谢,准备重新提rna,扩的片段有点长,将近900bp,担心rna质量、、、 2012-05-06 21:51:37
有降解   但RNA只要能够清楚的看到条带    就应该可以  
我做表达用的两年多的样品   一样能做的出来   
你i先反转录试试  用内参引物扩一下
11楼2012-05-06 11:47:09
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

做克隆的话没关系的,如果做定量就不行了。
12楼2012-05-06 19:17:24
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weining1203

新虫 (小有名气)

谢谢大家的回复,我打算重新提一下,克的片段有点长(900bp),感觉rna质量不行。。。
13楼2012-05-06 21:52:45
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)

降解不严重 就是里面没有洗干净 用氯仿多抽提几次会好些的
14楼2012-05-07 09:56:31
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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

做反转录你会得到假阳性的序列,因为你含有基因组DNA,所以你要先用DNASAE处理掉DNA才能往下做,否则你接下来克隆出的序列是不可靠的。这样的实验我也做过,用那个引物扩增基因组DNA和RT-PCR都能扩出条带,但序列信息是有所不同的
好好学习,天天向上
15楼2012-05-22 09:28:26
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