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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 这样的rna能不能做克隆,求大神分析。。。急。。。

今天提了rna,2号和3号孔(1号孔是别人的材料)的rna od260/280一个为2.36,一个2.34,不知还能不能做逆转录,求大侠们指点,急。。。如下图:
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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

做反转录你会得到假阳性的序列,因为你含有基因组DNA,所以你要先用DNASAE处理掉DNA才能往下做,否则你接下来克隆出的序列是不可靠的。这样的实验我也做过,用那个引物扩增基因组DNA和RT-PCR都能扩出条带,但序列信息是有所不同的
好好学习,天天向上
15楼2012-05-22 09:28:26
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-05-06 19:16:39
从形态上看是典型的RNA,降解也不严重,虽然与对照相比较浓度偏低,可以做逆转录试试。
2楼2012-05-05 14:41:23
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-05-05 14:41:23:
从形态上看是典型的RNA,降解也不严重,虽然与对照相比较浓度偏低,可以做逆转录试试。

谢谢回复 看着降解严重啊
3楼2012-05-05 15:56:47
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好像2号孔有基因组DNA,一般260/280的比值在:1.8-2.1,>2.2表明RNA已降解。
4楼2012-05-05 15:58:47
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