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hkxya7

金虫 (小有名气)

[求助] 盐析

我是做微生物抑菌物质的分析的,昨天我做了一下菌液的盐析。主要操作就是先将菌液12000转离心,随后往上清液中加入先前配好的饱和硫酸铵溶液,加的量不是很多,摇匀以后在4度冰箱上静置过夜。但是今天离心以后发现根本就没有沉淀,希望各位大侠帮我分析一下原因,急死了。。。。
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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hkxya7: 金币+1 2012-05-03 09:52:52
同意楼上的观点,是菌液中硫酸铵的饱和度,一般做蛋白、多肽类的盐析是将菌液的pH值调到所要提取物质的等电点左右,直接向菌液中加入硫酸铵,加量约为菌液量的40%左右。
5楼2012-05-03 09:28:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

得摸索硫酸铵的饱和度梯度
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-05-02 19:37:09
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hkxya7

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-02 19:37:09:
得摸索硫酸铵的饱和度梯度

我对硫酸铵配制了一系列的梯度,从饱和浓度10%到70%
3楼2012-05-02 20:49:38
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

不是硫酸铵溶液的饱和度,而是菌液中的硫酸铵的饱和度。
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4楼2012-05-03 06:25:25
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hkxya7

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-05-03 09:28:34:
同意楼上的观点,是菌液中硫酸铵的饱和度,一般做蛋白、多肽类的盐析是将菌液的pH值调到所要提取物质的等电点左右,直接向菌液中加入硫酸铵,加量约为菌液量的40%左右。

你的意思是直接加硫酸铵粉末?
6楼2012-05-03 09:51:25
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hkxya7

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-03 06:25:25:
不是硫酸铵溶液的饱和度,而是菌液中的硫酸铵的饱和度。

那这个硫酸铵加的量要多少?
7楼2012-05-03 09:52:20
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

得自己摸索,各人情况不同。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2012-05-03 17:49:58
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)

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本帖内容被屏蔽

9楼2012-05-04 14:51:58
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danbomingyue

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

10楼2012-05-04 14:52:53
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