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龚海天

铁杆木虫 (著名写手)

hero

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[求助] 血清灭活

各位虫友，请问我要培养Hek293和Hep G2细胞，购买的无支原体四季青胎牛血清需要灭活吗？怎么灭活？谢谢~~

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1楼 2012-04-28 20:50:15

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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

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四季青的胎牛血清上面应该写了未灭活吧？完全溶解后，五十六度水浴半个小时。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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我就是我

2楼2012-04-28 22:48:03

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sdaqlzm

金虫 (小有名气)

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忘了哪看来的：
1、化冻
将血清从-20度冰箱中取出，室温（或浸于自来水中）化冻（约需要30分钟至2小时，也可放于4度冰箱化冻过夜；化冻后若不马上灭活，可以放入4度冰箱中暂时保存）
2、灭活
（1）放入室温的水浴锅内开始加热（同时放入一个空的血清瓶，内装100ml自来水，插入一根温度计，温度监控以此为准）
（2）当温度计显示56度时，停止加热，改为间断加热，维持56度（±0.5度）30分钟（±3分钟；若不小心使温度上升超过56度，则：若仍未超过60度，且时间很短，比如不超过5分钟，则仍可使用；若超过60度，或者时间较长，则弃去不用，或者尝试用于一些普通细胞的培养）
（3）取出，自然冷却至室温（约需1-3小时），可分装或-20度继续冻存。
3、分装
（1）转入无菌间，在超净台内将血清分装入10ml离心管中（注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀；用吸液管或吹大管吹出血清时要注意：不要吹出气泡（血清很粘稠，很容易产生气泡；如果产生气泡，则在酒精灯火焰上过一下））
（2）放入-20度冰箱冻存
（3）全部操作约需要4-6小时

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加油！

3楼2012-05-01 09:09:22

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