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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » I & II型胶原蛋白
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毛阿毛

金虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-07-30 22:47:59
不溶解的话首先要看提取的胶原是否在组织内就交联了，比如较老的动物组织，还有一种情况就是冷冻干燥的时间过长也会造成不溶。至于去杂蛋白，你可以用0.02M的磷酸氢二钠来盐析，胶原蛋白会析出了，如果变性了，如明 ...

用0.02M的磷酸氢二钠 盐析？ 我之前都是用2.6M的 氯化钠诶  诶 去试试看~~~~灰常感谢啊   我想我买的那个标准品 溶解不了 真的是因为你说的那个交联了。。。。哎。。。。。容不了 电泳 怎么跑啊。。。太忧伤了
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11楼2012-08-01 18:59:39
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yaoming22

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

胶原蛋白的类型按来源区分。人体或动物体内含有I型、II型等16种型号的胶原蛋白，如皮肤和骨骼含的是I型胶原蛋白，软骨为II型，眼角膜为四型等等。分子结构上的区别为，I型胶原蛋白含有2条α链和1条β链、II型含有3条相同的α链。
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12楼2012-09-15 18:10:41
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fyn1986

新虫 (初入文坛)
最近在提取胶原蛋白，用的酸泡然后加胃蛋白酶提取，然后盐析，但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解，加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液，而且继续进行二次盐析未加氯化钠前，调节ph时有白色絮状沉淀析出，不知道是不是正常现象，第一次盐析前调ph时没有沉淀出现，有没有知道的啊？寻求帮助。。。
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13楼2012-11-29 13:37:06
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fyn1986

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-05-23 10:30:40
可以用SDS-PAGE来区别，I型胶原为异质胶原有两种α链，即，而II型胶原为同质胶原只有一种α链

最近在提取胶原蛋白，用的酸泡然后加胃蛋白酶提取，然后盐析，但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解，加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液，而且继续进行二次盐析未加氯化钠前，调节ph时有白色絮状沉淀析出，不知道是不是正常现象，第一次盐析前调ph时没有沉淀出现，有没有知道的啊？寻求帮助。。。
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14楼2012-11-29 13:38:03
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muziyu1024

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by fyn1986 at 2012-11-29 13:38:03
最近在提取胶原蛋白，用的酸泡然后加胃蛋白酶提取，然后盐析，但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解，加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液，而且继续进行二次盐析未加氯化钠前，调节ph时有白色絮状 ...

要看你用什么组织来提取的，跟腱的要难溶点，皮肤的好溶，溶解后为透明的溶液，盐析前不需要调pH值，直接在酸性条件下就能盐析，I型胶原在盐浓度5%左右开始析出。调节pH是会有白色絮状沉淀，因为调到等电点了
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15楼2012-11-29 17:18:04
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fyn1986

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-11-29 17:18:04
要看你用什么组织来提取的，跟腱的要难溶点，皮肤的好溶，溶解后为透明的溶液，盐析前不需要调pH值，直接在酸性条件下就能盐析，I型胶原在盐浓度5%左右开始析出。调节pH是会有白色絮状沉淀，因为调到等电点了...

非常感谢！！我是用的兔皮，加胃蛋白酶酶解后为白色溶液啊，然后加碱灭酶进行盐析，然后离心，沉淀再用0.5mol/L醋酸溶解时很难溶，即使溶解了也还是白色的溶液，为什么不是透明的溶液呢？还有就是盐析我是放在4℃过夜，过夜后看还是浑浊液，盐析完还有别的现象吗？
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16楼2012-11-30 10:42:16
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muziyu1024

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by fyn1986 at 2012-11-30 10:42:16
非常感谢！！我是用的兔皮，加胃蛋白酶酶解后为白色溶液啊，然后加碱灭酶进行盐析，然后离心，沉淀再用0.5mol/L醋酸溶解时很难溶，即使溶解了也还是白色的溶液，为什么不是透明的溶液呢？还有就是盐析我是放在4℃过 ...

兔子皮我没做过，具体你的酶解后是什么我也不知道，建议酶解后离心一下，上清液盐析，看有无沉淀。盐析后有白色沉淀是正常的，胶原析出为白色的沉淀。
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17楼2012-12-02 17:09:32
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zlzwin

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-06-05 12:56:32
文献上写的很明白了啊，你如还有什么问题可以提出来大家探讨，我的研究方向是胶原蛋白

我有问题请教， 我想了解一下胶原在医学上的应用 能给我推荐初级入门的书了  书名吧~
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18楼2013-03-13 12:34:23
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muziyu1024

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by zlzwin at 2013-03-13 12:34:23
我有问题请教， 我想了解一下胶原在医学上的应用 能给我推荐初级入门的书了  书名吧~...

顾其胜《胶原蛋白与临床医学》
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19楼2013-03-14 13:32:21
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杨灰灰99

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-06-05 12:56:32
文献上写的很明白了啊，你如还有什么问题可以提出来大家探讨，我的研究方向是胶原蛋白

请问I型胶原蛋白的等电点是多少？
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20楼2016-11-08 14:24:40
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