24小时热门版块排行榜    

查看: 3155  |  回复: 20
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看

毛阿毛

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-07-30 22:47:59
不溶解的话首先要看提取的胶原是否在组织内就交联了,比如较老的动物组织,还有一种情况就是冷冻干燥的时间过长也会造成不溶。至于去杂蛋白,你可以用0.02M的磷酸氢二钠来盐析,胶原蛋白会析出了,如果变性了,如明 ...

用0.02M的磷酸氢二钠 盐析? 我之前都是用2.6M的 氯化钠诶  诶 去试试看~~~~灰常感谢啊   我想我买的那个标准品 溶解不了 真的是因为你说的那个交联了。。。。哎。。。。。容不了 电泳 怎么跑啊。。。太忧伤了
11楼2012-08-01 18:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaoming22

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

胶原蛋白的类型按来源区分。人体或动物体内含有I型、II型等16种型号的胶原蛋白,如皮肤和骨骼含的是I型胶原蛋白,软骨为II型,眼角膜为四型等等。分子结构上的区别为,I型胶原蛋白含有2条α链和1条β链、II型含有3条相同的α链。
12楼2012-09-15 18:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fyn1986

新虫 (初入文坛)

最近在提取胶原蛋白,用的酸泡然后加胃蛋白酶提取,然后盐析,但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解,加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液,而且继续进行二次盐析未加氯化钠前,调节ph时有白色絮状沉淀析出,不知道是不是正常现象,第一次盐析前调ph时没有沉淀出现,有没有知道的啊?寻求帮助。。。
13楼2012-11-29 13:37:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fyn1986

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-05-23 10:30:40
可以用SDS-PAGE来区别,I型胶原为异质胶原有两种α链,即,而II型胶原为同质胶原只有一种α链

最近在提取胶原蛋白,用的酸泡然后加胃蛋白酶提取,然后盐析,但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解,加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液,而且继续进行二次盐析未加氯化钠前,调节ph时有白色絮状沉淀析出,不知道是不是正常现象,第一次盐析前调ph时没有沉淀出现,有没有知道的啊?寻求帮助。。。
14楼2012-11-29 13:38:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muziyu1024

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by fyn1986 at 2012-11-29 13:38:03
最近在提取胶原蛋白,用的酸泡然后加胃蛋白酶提取,然后盐析,但是第一次盐析完了之后再用0.5mol/L的醋酸溶解很难溶解,加打醋酸浓度才能溶解成白色胶原液,而且继续进行二次盐析未加氯化钠前,调节ph时有白色絮状 ...

要看你用什么组织来提取的,跟腱的要难溶点,皮肤的好溶,溶解后为透明的溶液,盐析前不需要调pH值,直接在酸性条件下就能盐析,I型胶原在盐浓度5%左右开始析出。调节pH是会有白色絮状沉淀,因为调到等电点了
15楼2012-11-29 17:18:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fyn1986

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-11-29 17:18:04
要看你用什么组织来提取的,跟腱的要难溶点,皮肤的好溶,溶解后为透明的溶液,盐析前不需要调pH值,直接在酸性条件下就能盐析,I型胶原在盐浓度5%左右开始析出。调节pH是会有白色絮状沉淀,因为调到等电点了...

非常感谢!!我是用的兔皮,加胃蛋白酶酶解后为白色溶液啊,然后加碱灭酶进行盐析,然后离心,沉淀再用0.5mol/L醋酸溶解时很难溶,即使溶解了也还是白色的溶液,为什么不是透明的溶液呢?还有就是盐析我是放在4℃过夜,过夜后看还是浑浊液,盐析完还有别的现象吗?
16楼2012-11-30 10:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muziyu1024

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by fyn1986 at 2012-11-30 10:42:16
非常感谢!!我是用的兔皮,加胃蛋白酶酶解后为白色溶液啊,然后加碱灭酶进行盐析,然后离心,沉淀再用0.5mol/L醋酸溶解时很难溶,即使溶解了也还是白色的溶液,为什么不是透明的溶液呢?还有就是盐析我是放在4℃过 ...

兔子皮我没做过,具体你的酶解后是什么我也不知道,建议酶解后离心一下,上清液盐析,看有无沉淀。盐析后有白色沉淀是正常的,胶原析出为白色的沉淀。
17楼2012-12-02 17:09:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlzwin

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-06-05 12:56:32
文献上写的很明白了啊,你如还有什么问题可以提出来大家探讨,我的研究方向是胶原蛋白

我有问题请教, 我想了解一下胶原在医学上的应用 能给我推荐初级入门的书了  书名吧~
18楼2013-03-13 12:34:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muziyu1024

金虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by zlzwin at 2013-03-13 12:34:23
我有问题请教, 我想了解一下胶原在医学上的应用 能给我推荐初级入门的书了  书名吧~...

顾其胜《胶原蛋白与临床医学》
19楼2013-03-14 13:32:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨灰灰99

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by muziyu1024 at 2012-06-05 12:56:32
文献上写的很明白了啊,你如还有什么问题可以提出来大家探讨,我的研究方向是胶原蛋白

请问I型胶原蛋白的等电点是多少?
20楼2016-11-08 14:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 罗密欧不在家 的主题更新
信息提示
请填处理意见