登录注册

24小时热门版块排行榜

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-29 17:21:44

两条引物为什么差这么多，一般差三度以内为最好，选择较低的温度再减去5度左右，如果有条带则0.5到1度的网上增加。

11楼2012-04-28 16:41:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

金虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

组氨酸标签不在基因组上吧？
如果不在的话，那就按照去除标签后剩下的序列算TM值。
不知道我理解的对不对

12楼2012-04-29 00:33:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

银虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 有道理！头像的杯子很帅，O(∩_∩)O哈哈~ 2012-04-29 17:23:14

理论上，计算引物Tm值时不考虑另外引入的标签序列或者酶切位点序列等，建议重新计算下下游引物的Tm，然后取两条引物中较低Tm值。退火温度大概等于较低Tm-5。同时建议做Ta值的梯度优化实验来找到最佳Ta。
希望能有用。

13楼2012-04-29 01:44:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

银虫 (小有名气)

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励新虫 2012-04-29 17:22:02

你这差的也太多了吧，你可以跑下梯度，我个人觉得这个引物的设计有问题

14楼2012-04-29 07:42:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 viki_MDK 的主题更新