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biomasterdoc

金虫 (正式写手)

[求助] 菜鸟求助:如何确定两个已知蛋白之间存在上下游的调节作用?谢谢!

RT。如何验证两个已知的蛋白之间存在上下游的调节作用?这两个蛋白是已知的(细胞周期负调控因子:CIP/KIP家族的P27和P57),只是不确定二者之间是否存在相互作用。现在要探究二者之间的联系,该如何研究?

菜鸟在此谢谢各位大神的指点!能提供一些思路是最好了,或者提供相关研究文献也可(目前的文献貌似只在描述二者各自对周期调控的作用机制,尚未发现二者相互关系的报道)。再次感谢各位!

二者可能的情况如下:

(1)P27在P57的上游:
①P27蛋白调节P57基因的转录或翻译;
②P27蛋白调节P57蛋白的功能;
③二者之间的作用可能是直接,也可能是间接(通过中间蛋白起作用);

(2)P27在P57的下游:
即P57对P27进行调节。

(3)P27和P57之间不存在任何相互作用,各自独立起作用。
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
telomerase: 金币+2, 谢谢你的热心应助!! 2012-04-30 11:57:39
biomasterdoc: 金币+1, ★★★很有帮助, Thanks! 2012-05-31 02:18:03
如果是直接的互作   用COIP
如果是间接的话     Knock down上游那个  看看下游的表达有没有变化
3楼2012-04-30 01:44:39
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zqa224

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
telomerase: 金币+3, 欢迎新虫!!!谢谢你的热心应助!! 2012-04-30 11:57:26
不负责任的说:你直接使用生物分子相互作用的方法试试,SPR技术或BLI(Bio-Layer Interferometry)技术,它们可以直接检测蛋白和DNA,以及蛋白和蛋白之间的是否有作用哦!!
2楼2012-04-29 22:07:49
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