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maben1556

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-04-24 14:10:02
TBE配方可以在分子克隆那本书上查到网上也容易搜到,我就不给你细说了。
银染过程是:
1.电泳完毕后,取下胶水洗1min
2.银染(1g AgNO3+1L H2O)至少8min
3.再水洗1min
4.把胶转移到NaOH显影液中(16g NaOH+8ml  ...

你好,我想问下你的银染方法效果怎样?你们的DNA最小的是多少bp
11楼2012-06-14 16:04:31
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

用银染 PCR产物加入溴酚蓝直接往胶里面加,胶为非变性的,整块胶浓度一样,胶的浓度30%  这个不定,用TBE或TAE都是差不多的,但是假如你用TBE电泳,胶里面也是TBE。电压在200左右 ,高点跑得快点。染色有3步,固定,渗透,显色,后面显色出来的胶直接观片灯上面看就行啦!
低调稳重务实内敛---------------残
12楼2012-06-15 11:24:17
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

聚丙烯酰胺的都用银染,效果看你的PCR产物和染色技术!反正我染的挺好!
低调稳重务实内敛---------------残
13楼2012-06-15 11:26:09
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hyc_charles

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yanfeier at 2012-04-24 14:29:28
那PCR产物上胶跑之前是不是也的加入5*loadingbuffer煮沸呢?...

你说的是变性凝胶跑之前要对样品进行变性处理,50μL体系的产物与5μLbuffer混匀,95℃15min,另外要预电泳30min左右
不但要做一个优秀的人,更要做一个无可取代的人…
14楼2013-07-22 19:20:10
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