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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 银染色聚丙烯酰胺凝胶电泳
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maben1556

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-04-24 14:10:02
TBE配方可以在分子克隆那本书上查到网上也容易搜到，我就不给你细说了。
银染过程是：
1.电泳完毕后，取下胶水洗1min
2.银染(1g AgNO3+1L H2O)至少8min
3.再水洗1min
4.把胶转移到NaOH显影液中（16g NaOH+8ml  ...

你好，我想问下你的银染方法效果怎样？你们的DNA最小的是多少bp
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11楼2012-06-14 16:04:31
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
用银染 PCR产物加入溴酚蓝直接往胶里面加，胶为非变性的，整块胶浓度一样，胶的浓度30%  这个不定，用TBE或TAE都是差不多的，但是假如你用TBE电泳，胶里面也是TBE。电压在200左右 ，高点跑得快点。染色有3步，固定，渗透，显色，后面显色出来的胶直接观片灯上面看就行啦！
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低调稳重务实内敛---------------残
12楼2012-06-15 11:24:17
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
聚丙烯酰胺的都用银染，效果看你的PCR产物和染色技术！反正我染的挺好！
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低调稳重务实内敛---------------残
13楼2012-06-15 11:26:09
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hyc_charles

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yanfeier at 2012-04-24 14:29:28
那PCR产物上胶跑之前是不是也的加入5*loadingbuffer煮沸呢？...

你说的是变性凝胶跑之前要对样品进行变性处理，50μL体系的产物与5μLbuffer混匀，95℃15min，另外要预电泳30min左右
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不但要做一个优秀的人，更要做一个无可取代的人…
14楼2013-07-22 19:20:10
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