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窦愚之

金虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by qionghuang at 2012-04-27 10:14:18:
营养体的培养基和芽孢的培养基不一样啊

应该一样吧,网上还真没有芽孢悬液的培养方法,很难琢磨
11楼2012-04-27 10:32:57
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窦愚之

金虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 郝钊 at 2012-04-25 22:31:54:
你理解错了,我的意思是固体培养,就可以得到芽孢,菌悬液的制备是为了得到你所需要的高浓度芽孢悬液。
另一个方法是液体长时间培养……

我收集高浓度芽孢主要是用来研究该芽孢的灭菌条件,芽孢数目不够没法研究啊,能给点建议吗?
12楼2012-04-27 10:34:14
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liyu6655

禁虫 (小有名气)

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13楼2012-04-27 16:03:27
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郝钊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-29 20:24:45
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12楼: Originally posted by 窦愚之 at 2012-04-27 10:34:14:
我收集高浓度芽孢主要是用来研究该芽孢的灭菌条件,芽孢数目不够没法研究啊,能给点建议吗?

按照前面的方法得到长满芽孢的平板,收集芽孢后重悬,少加生理盐水或者培养基就是了,如果浓度不够高,可以离心后加更少的生理盐水重悬。
之前我们将芽孢菌悬液涂布于LB培养基上,隔夜培养后就放在四度冰箱,一段时间后芽孢染色观察几乎全是芽孢状态,没有营养体。难道你的那株芽孢菌比较特殊?既然为了研究灭菌条件,菌株是哪个无所谓,那就随便找个枯草芽孢杆菌来做吧,很泼辣,生孢很快。
14楼2012-04-29 19:02:31
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窦愚之

金虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 郝钊 at 2012-04-25 22:31:54:
你理解错了,我的意思是固体培养,就可以得到芽孢,菌悬液的制备是为了得到你所需要的高浓度芽孢悬液。
另一个方法是液体长时间培养……

求助,我将培养好的菌悬液用100度10分钟,杀灭营养体,之后稀释涂布计数,这样来计算芽孢数科学吗?但是结果显示芽孢数很低,不会是100度把芽孢也大量杀死了吧,应该是悬液中的芽孢数本来就很低吧?
15楼2012-05-02 07:43:01
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窦愚之

金虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by phoenix.ren at 2012-04-25 22:32:59:
我以前的芽孢都是这样搞定的。

求助,我将培养好的菌悬液用100度10分钟,杀灭营养体,之后稀释涂布计数,这样来计算芽孢数科学吗?但是结果显示芽孢数很低,不会是100度把芽孢也大量杀死了吧,应该是悬液中的芽孢数本来就很低吧?
16楼2012-05-02 07:43:17
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窦愚之

金虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by qionghuang at 2012-04-27 10:14:18:
营养体的培养基和芽孢的培养基不一样啊

不一样在什么地方呢,芽孢不就是从营养体变过来的吗?
17楼2012-05-02 07:44:39
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窦愚之

金虫 (小有名气)

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13楼: Originally posted by liyu6655 at 2012-04-27 16:03:27:
液体培养基养好了,四度静置2天就ok

我都静置n天了,芽孢数目仍然很低
18楼2012-05-02 07:46:17
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qionghuang

新虫 (小有名气)

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17楼: Originally posted by 窦愚之 at 2012-05-02 07:44:39:
不一样在什么地方呢,芽孢不就是从营养体变过来的吗?

养营养体我们用LB 晶体和芽孢我们用ICPM,你可以去看文献的啊
19楼2012-05-02 08:51:03
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郝钊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
窦愚之: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-04 21:18:50
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15楼: Originally posted by 窦愚之 at 2012-05-02 07:43:01:
求助,我将培养好的菌悬液用100度10分钟,杀灭营养体,之后稀释涂布计数,这样来计算芽孢数科学吗?但是结果显示芽孢数很低,不会是100度把芽孢也大量杀死了吧,应该是悬液中的芽孢数本来就很低吧?

你用一百度处理十分钟对芽孢影响不大,可能你的这株菌本来产孢能力就弱,就先摸摸条件吧。试试不同的培养基,不同的培养条件。另外查查与你们做的菌相关的文献,对菌株有个清晰的认识之后也许会解决问题。
20楼2012-05-04 15:34:30
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