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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酵母的培养，关于重复重复实验
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)

[求助] 酵母的培养，关于重复重复实验

为什么我培养酵母的3支试管做出的重复实验菌体浓度都长的不一样？我是先接种在100ml培养基中，然后再每管5ml分装在试管中的（每次分装之前我都先混匀的）。
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春晓赏花，夏日听蝉，箫吹秋月，酒饮冬霜~
1楼 2012-04-19 09:10:41
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

【答案】应助回帖

★
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皇马铁卫: 金币+1 2012-04-19 11:16:45
虽然先接种在100ml瓶中，但你分装到试管时不能完全保证孢子的数量完全一样，孢子数量不一样所以结果可想而知了。
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希望大家多多交流。
2楼2012-04-19 09:44:56
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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皇马铁卫: 金币+3, 菌体浓度以测OD600 2012-04-19 11:15:32
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2012-04-19 09:44:56:
虽然先接种在100ml瓶中，但你分装到试管时不能完全保证孢子的数量完全一样，孢子数量不一样所以结果可想而知了。

孢子啊？是酵母菌诶，孢子？这种情况下菌体浓度不一样首先考虑定量的方法可靠不可靠。再就是考虑偶然误差的因素。
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3楼2012-04-19 10:55:22
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2012-04-19 09:44:56:
虽然先接种在100ml瓶中，但你分装到试管时不能完全保证孢子的数量完全一样，孢子数量不一样所以结果可想而知了。

额，这个是毕赤酵母，没有孢子的
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4楼2012-04-19 11:14:11
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wjf008 at 2012-04-19 10:55:22:
孢子啊？是酵母菌诶，孢子？这种情况下菌体浓度不一样首先考虑定量的方法可靠不可靠。再就是考虑偶然误差的因素。

以测OD600定量，比较常用的吧，有的时候重复试验差别很大，偶然误差应该不会这么大吧
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春晓赏花，夏日听蝉，箫吹秋月，酒饮冬霜~
5楼2012-04-19 11:17:45
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JamesZu

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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可能是培养条件不一致（我指得是培养条件仪器上显示一致实际出问题了）
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6楼2012-04-19 12:36:35
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依然@叶

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，想知道下，你在接种的时候摇匀了吗？或者说，你确定你摇匀了吗？我觉得可能是你没有完全摇匀的结果，
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哀莫大于心死
7楼2012-04-19 22:23:42
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皇马铁卫

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 依然@叶 at 2012-04-19 22:23:42:
楼主，想知道下，你在接种的时候摇匀了吗？或者说，你确定你摇匀了吗？我觉得可能是你没有完全摇匀的结果，

之前考虑过这个问题，所以之后几次都是仔细摇过的
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春晓赏花，夏日听蝉，箫吹秋月，酒饮冬霜~
8楼2012-04-20 08:51:35
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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皇马铁卫: 金币+7, ★有帮助 2012-04-20 12:22:01
我觉得还是先放小摇瓶上摇床15-20min后再分装，那样排除没摇匀的可能性
还有分装仪器，五毫升都是用移液管吧？
每次都同一个人分装，一个循环都同一个人分装，那样人为操作误差会少些
如果还不行，就换精确的量取仪器
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9楼2012-04-20 11:15:02
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xtcao668

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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一般外文文献接种时测定平行之间的OD值一致！
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生活的理想就是理想的生活
10楼2012-04-20 22:52:40
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