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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 药代动实验时间点取血离心问题
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cpumantiszj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jcinta-MS: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-20 08:19:39
楼主能否说明下取血的方法？取血的方式，手法的熟练程度，更可能决定你的溶血程度。我觉得离心转速确实偏高，基本6000rpm足够了。另外，建议用肝素抗凝。
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11楼2012-04-19 10:55:23
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xull19860419

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们使用的是5000,10min,4度
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12楼2012-04-19 15:25:01
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jcinta-MS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xpkb at 2012-04-18 20:18:00:
一般是4000转10分钟，一般用肝素抗凝，离心比较彻底

好像用肝素的人还是占多数。。。。
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13楼2012-04-20 08:17:21
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jcinta-MS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-04-19 09:26:42:
溶血可能压根和转速就没有关系，我以前取血浆用过15.4*1000g的转速，如果出现了溶血建议看一下离心温度，如果别人用的时候设定温度为4度什么的，低温很容易造成溶血的。

我们是4°离心呢。。。
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14楼2012-04-20 08:17:42
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jcinta-MS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by cpumantiszj at 2012-04-19 10:55:23:
楼主能否说明下取血的方法？取血的方式，手法的熟练程度，更可能决定你的溶血程度。我觉得离心转速确实偏高，基本6000rpm足够了。另外，建议用肝素抗凝。

直接断头取血，肝素和EDTA有啥区别呢？
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15楼2012-04-20 08:19:16
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jonathonswq

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by jcinta-MS at 2012-04-20 08:19:16:
直接断头取血，肝素和EDTA有啥区别呢？

断头取血要尽量避免沾染毛发，否则肯定溶血的，如果是小鼠可能采用摘眼球取血，样品会相对干净些。
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面对滇池，背靠西山，听龙门风雨，看海梗海鸥飞翔。
16楼2012-04-20 10:42:30
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cpumantiszj

木虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by jcinta-MS at 2012-04-20 08:19:16:
直接断头取血，肝素和EDTA有啥区别呢？

肝素毕竟是生物来源的杂多糖，其抗凝效果以及对血成分的保护肯定是最优的，具体原理其实我也不懂。但是这位朋友，肝素也不贵，EDTA只是一个小分子金属离子螯合剂，效果毕竟要差点，如果你非得刨根问底的知道区别在哪，我真的不懂。如果你 不是做机理方面，没必要为这个钻牛角尖，要你掌握的科研思路 新文献 实验技能改进方面事情太多了，时间花在更重要的方面吧。另外断头取血，铡刀下手一定要快（安全前提下，别因不熟练又一味求快铡破了手，熟能生巧吧）。买些肝素化的毛细管，眼眶取血，或者直接摘眼球取血，效果可能更好，得到的血量也更多。
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17楼2012-04-20 23:19:49
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cxc268

金虫 (正式写手)
先肝素抗凝，血浆样品一般是2500-3000rpm，离心5-10min，可以用甲醇沉淀蛋白
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疯狂的双子座
18楼2012-04-22 16:11:32
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酷闪

铜虫 (初入文坛)
还有这个与离心机的半径有关，小离心机，在同样转速、半径小的情况下，离心力小，所以也不能为3500，这样太小，可以设为6000.
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做真正的自己！！！
19楼2012-04-22 22:10:05
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jcinta-MS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by cpumantiszj at 2012-04-20 23:19:49:
肝素毕竟是生物来源的杂多糖，其抗凝效果以及对血成分的保护肯定是最优的，具体原理其实我也不懂。但是这位朋友，肝素也不贵，EDTA只是一个小分子金属离子螯合剂，效果毕竟要差点，如果你非得刨根问底的知道区别 ...

说的很有道理~
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20楼2012-04-23 21:57:16
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