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chibang1220

木虫 (著名写手)

[求助] 基因顺序重排怎么做?

我现在有一个产物需要4个基因才能合成,并且这4个基因在一起,形成一个基因簇。现在我想把这4个基因(标记为ABCD)顺序改变,怎么做啊?
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人的差别在于业余时间
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dmzha

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chibang1220: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-04-18 11:04:48
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 恩,鼓励提供有价值的应助哦 2012-04-18 17:20:08
首先,以你需要的顺序融化PCR扩增ABCD四个基因;
其次,PCR扩增该基因簇两端的同源臂(1000 bp左右);
再次,将同源臂与你扩增的ABCD四个基因(顺序改变的)酶连起来,再连入自杀质粒中构建同源重组质粒;
最后,将同源重组质粒转化到你的菌株中,筛选获得ABCD基因顺序改变的菌株。
2楼2012-04-18 10:38:19
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chibang1220

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dmzha at 2012-04-18 10:38:19:
首先,以你需要的顺序融化PCR扩增ABCD四个基因;
其次,PCR扩增该基因簇两端的同源臂(1000 bp左右);
再次,将同源臂与你扩增的ABCD四个基因(顺序改变的)酶连起来,再连入自杀质粒中构建同源重组质粒;
最 ...

嗯,谢谢你,我已经有思路了,不过我会采纳你的方法的,十分感谢啊
人的差别在于业余时间
3楼2012-04-18 11:04:32
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dmzha

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chibang1220 at 2012-04-18 11:04:32:
嗯,谢谢你,我已经有思路了,不过我会采纳你的方法的,十分感谢啊

不用谢,希望能有帮助。
4楼2012-04-18 15:43:46
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