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qiuniao

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱柱可以通用吗

之前测氨基酸的时候买了根waters Nova-pac C18柱  老板又要我测个酯类物质 文献上用的是Shim-pack VP-ODS(C18) 柱 请问能用我原来那根柱子测吗?

做氨基酸分析 是用缓冲盐和乙腈做流动相的 老板又要我测个别的物质不是氨基酸类的 是酯类 看文献上用的流动相是90%甲醇 想问下如何平衡柱子 最后用什么比例冲柱子呢?

[ Last edited by 佳怡 on 2012-4-14 at 21:12 ]
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hjylmj

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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qiuniao: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-04-18 09:00:28
完全可以,自己根据文献摸摸条件就行了
你原本的柱子比文献的柱子长和窄,粒径更小,理论上来说应该能获得更好的分离效果的。保留时间应该会延长。
至于平衡柱子的话,首先看你是梯度还是等度。如果是梯度,那么梯度程序中就要加入平衡柱子的程序。具体平衡多长时间,新柱子半个小时就可以了。你可以自己做小实验确认一下,进几针,如果基线平了、保留时间和压力都没太大变化就意味着平衡好了。
如果要用90%甲醇,建议开始的时候先用大比例水相冲洗系统,之前没洗干净的缓冲盐析出,堵坏了柱子。waters的柱子好贵的,弄坏了,我怕你老板杀了你的心都有了
16楼2012-04-17 19:13:20
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

我查了下原来测氨基酸的柱子是这样的:3.9*300mm ,4um
而现在文献上测酯类的柱子是这样的:4.6*150mm,5m
我现在可以用原来的柱子测吗
不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
2楼2012-04-14 21:37:30
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jiyuan-yang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以使用同一根柱子,只要柱的极性相当就可以
3楼2012-04-14 21:44:47
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gwwgww5566

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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soundhorizo: 金币+1, 感谢应助 ^^ 2012-04-15 20:14:51
测氨基酸有专门的氨基酸柱,一般情况下150mm、5um的柱子能够提供足够的理论塔板数,可以按文献来。一般做样要走30min的基线,基线平了柱子也就平衡好了。流动相要是含有缓冲盐的话冲柱子不可用纯有机相冲,防止盐在柱子中析出。
自信&真诚
4楼2012-04-15 10:25:09
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