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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE电泳问题
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by steler_ly at 2012-04-15 10:36:30:
大部分原因是由于你的凝胶不均匀啦，倒胶不要磨蹭太久，等胶充分凝结后再电泳！

我可以肯定今天的胶凝的是没有问题的，但是出来的图还是那样的。还有没有可能是其他的原因呢
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11楼2012-04-16 19:59:26
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by chunqizzm at 2012-04-15 22:56:45:
看看图片再说话

你看看，就是图上的那种样子
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12楼2012-04-16 20:04:58
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 18853850850 at 2012-04-14 18:18:10:
很大原因是因为胶凝的不好，上下不均匀，如楼上，传张图看看

就是这个样子的，今天我又做了一遍还是图上的效果，您帮我分析一下怎么回事
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13楼2012-04-16 20:06:56
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by sl35537417 at 2012-04-14 00:14:22:
无图无真相

我传上来了，你看看，你有没有遇到到这样的问题啊
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14楼2012-04-16 20:07:49
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by YZQ_XM at 2012-04-16 13:33:11:
凝胶不均匀。=胶凝充分了，再开始跑电泳。

我今天又做了一次，结果还是那样的，你看看，就像图上那样
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15楼2012-04-16 20:09:18
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chunqizzm

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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12楼: Originally posted by shuanger2010 at 2012-04-16 20:04:58:
你看看，就是图上的那种样子
11/76/1178374_1334577877_691.jpg

从右数过来的第3道和第10道是不是Marker啊？
如果是的话，首先Marker没问题，可以排除凝胶和缓冲及电泳体系的问题。
从图上看你的上样量是不是有点大啊？超过了胶孔的承受力。建议减少上样量试试。说实话，我也没遇到过这种情况。希望尽快给出进一步结果。
另外，从右边起的5-7道是不是发生降解了啊？
多介绍一些信息，便于大家帮你分析原因
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shuanger2010
16楼2012-04-16 20:44:26
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shuanger2010

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by chunqizzm at 2012-04-16 20:44:26:
从右数过来的第3道和第10道是不是Marker啊？
如果是的话，首先Marker没问题，可以排除凝胶和缓冲及电泳体系的问题。
从图上看你的上样量是不是有点大啊？超过了胶孔的承受力。建议减少上样量试试。说实话，我也 ...

多谢你那么认真的回答，第3道和第10道是maker，5-7条是将蛋白酶解之后的酶解液跑出来的效果，分子量比较小，应该是那样的。
第8和第11条是小麦面筋蛋白，第4条是麦胚蛋白，第一条和第二条是帮别人带的燕麦蛋白。这几种蛋白的条带都有不同程度的漏斗状，尤其是小麦面筋蛋白那两条。如果是上样量大的话它该是从上到下都很粗啊，怎么会在中间这个位置突然变细了呢，唉，郁闷啊
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17楼2012-04-16 20:54:16
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wangyh2028

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker没有问题，很明显是蛋白质样品的问题，重新提取样品，可能是样品盐离子浓度过高，脱盐
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18楼2012-04-21 10:23:38
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不鸣鸟

木虫 (正式写手)
你的凝胶浓度，时间，温度，光照什么的可以发来大家看看吗？
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19楼2012-04-21 11:23:37
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sunnyseu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
shuanger2010: 金币+2 2012-06-26 18:50:17
可能是左右几个孔里加的蛋白浓度不一致。。。。导致对蛋白浓度低那个孔造成挤压。。。
最好蛋白浓度一致以后再跑电泳。。。
希望能帮到你
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20楼2012-06-07 21:30:18
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