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[求助]
DsRed2作为融合蛋白标签
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最近遇到了一个难题,我要表达一段原核膜蛋白,在膜蛋白的C段连接了一个红色荧光蛋白DsRed2,20度诱导,荧光监测,48h后荧光强度不再增加(此时菌体用肉眼观察已经非常红),收集菌体,高压低温破碎三次,14000rpm离心,但是离心后发现沉淀比上清还红,这是什么原因呢?离心后的沉淀不就是未破碎的细胞,细胞碎片,还有可能是包涵体么,怎么会比上清还红呢?如果是形成了包涵体应该看不到颜色呀.离心后的上清用detergent溶解过夜,然后20000rpm离心,发现上清一点也不红了,也是沉淀特别红,我的蛋白去哪了?郁闷,求教高手指教![]() |
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