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用Trinity进行de novo拼装
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七八月的阳光
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用Trinity进行de novo拼装
最近在公司做了转录组测序,植物样本,illumina Hiseq2000,三个样本共100M的clean reads,一起拼接。该公司用Trinity软件进行de novo拼接,拼出来contigs达40多万条,后来又用CD-HIT进行聚类,结果仍有30多万条,其中包含很多转录本的存在。从文献中看一般植物转录组de novo拼接也就几万条序列,太多的转录本会影响到后面表达量的比较。不知道是由于Trinity这个拼接软件的原因还是其他什么原因。
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2012-04-11 16:40:10
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15楼
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Originally posted by
gaoyang636
at 2012-04-16 19:52:12:
我个人感觉数据可靠性的高低,和你的contig长度/数量没有直接关系呢?
你现在contig比较多的原因是因为:1 通量不足以拼的好;2 二代高通量读长比较短; 3 转录组本身de novo拼接就不好弄,并不能看出来怎么质量 ...
可能真是多虑了。
我先往后做做看好了。
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16楼
2012-04-17 08:12:51
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gaoyang636
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植物的基因组多大呢?
contig的N50有多少?
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2012-04-11 16:50:53
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2楼
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Originally posted by
gaoyang636
at 2012-04-11 16:50:53:
植物的基因组多大呢?
contig的N50有多少?
不知道呢,可能很大,有90多条染色体。
选取的contig为200bp以上,N50为558
不知道是不是和多倍体重复基因有关系
第一次发金币,发出去了吗?
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3楼
2012-04-11 16:57:55
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zhaohq1209: 金币+4, 学习了~欢迎继续交流哈
2012-04-13 11:28:17
我个人感觉是你的测序深度太小,而不是软件的问题,即便把其他的拼接软件都用一遍,也不会有什么明显改善。
如果你想把contig尽量拼好一点,进行项目的时候就应该和公司讨论好。才100M的reads,不够的。看看文献上的测序量有多少?
不过转录组本来也不要求拼长,直接去比对也可以的。你如果是觉得contig太多,就过滤一下吧,比如,选400bp以上的?
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4楼
2012-04-12 08:26:10
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