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flyy1986

铜虫 (小有名气)

[交流] 避免可溶性寡聚体的形成 已有1人参与

包涵体复性过程中经常蛋白聚集反应而沉淀,而我做的几个蛋白在复性过程中也发生了聚集反应,不过形成了稳定的可溶性的寡聚体。这个可溶的寡聚体可以挂上Ni柱,但不能吸附在离子交换树脂上。为了避免可溶性寡聚体的形成,已经尝试了添加分子聚集抑制剂(如L-Arg、甘油等)、缓慢降低变性剂浓度(连续梯度方法如反向稀释和连续透析)、人工分子伴侣复性系统、柱复性、极端pH方法及这几种方法的组合等,最后结果还是蛋白聚集反应很顽强。在此与大家交流一下还有什么好的方法或者建议。谢谢!
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yylc1840

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zhaohq1209: 金币+2, 鼓励交流哈 2012-04-16 13:26:33
不知蛋白大小如何,有个师兄5个氨基酸一组做突变,终于得到了蛋白的单体,蛋白20KD左右,工作量大点
2楼2012-04-16 12:43:32
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