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koojames23

木虫 (小有名气)

[交流] 一个酶同时在载体上切两个位点属于双酶切还是单酶切 已有9人参与

同一个酶,比如EcoR I,同时在载体上切两个位点,应该是属于双酶切还是单酶切?
个人觉得应该是双酶切,但貌似又不符合双酶切的定义,不知道大家怎么认为
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红魔
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lw19850128

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-04-10 20:19:07:
单酶切,但如果你需要用这个酶进行酶切分析,那么完全酶切所需的酶量就比一个切点时多一倍,具体计算,可以参考Double digestion designer

酶切专家? 借此贴请教个问题。。。双酶切时如果两个酶切位点紧挨着一般采用什么方法?是需要先切完一个位点开环后再切另一个么?最近搞的晕死了  试了好多次 好像都没双切成功,求教啊(本人用takara的酶  buffer是M)
14楼2012-04-13 09:51:43
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koojames23

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by j2 at 2012-04-10 19:14:11:
单酶切。。。

理由呢?
红魔
3楼2012-04-10 19:35:50
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j2

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一种酶识别一种特定的脱氧核苷酸序列,只是恰好你这个片段上有2个这样的序列。。。
修炼ing,当虫仙……
4楼2012-04-10 19:41:21
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scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个应该是单酶切,不过有两个识别位点的情况下,一般就不要选用这个酶了。
5楼2012-04-10 19:52:36
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