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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TA克隆为什么长一片啊
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-09 18:24:33
我们实验室做TA克隆经常长一板的，而且没有什么假阳性的，你可以验证一下啊，为什么别人长得少，咱的就得长的少呢？感受态效率比较高，连接体系比较合适的时候就应该长的挺多啊~~
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11楼2012-04-09 15:04:57
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-04-09 15:04:57:
我们实验室做TA克隆经常长一板的，而且没有什么假阳性的，你可以验证一下啊，为什么别人长得少，咱的就得长的少呢？感受态效率比较高，连接体系比较合适的时候就应该长的挺多啊~~

你们用的是哪个公司的T载体啊？还有条件是不是就是按说明书做的？
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12楼2012-04-09 15:33:24
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

takara的，条件就是普通的连接转化，我现在做这些分子实验，特别是TA克隆，就没有计算过需要加多少目的片段什么的，直接就是目测，差不多就没什么问题。
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13楼2012-04-09 15:35:21
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黄油411

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-09 11:29:17:
哈哈..........
佩服大哥 偶眼拙

共同学习，共同进步，以后有机会再交流交流试验心得。
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专心做抗体
14楼2012-04-09 16:27:01
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-04-09 15:35:21:
takara的，条件就是普通的连接转化，我现在做这些分子实验，特别是TA克隆，就没有计算过需要加多少目的片段什么的，直接就是目测，差不多就没什么问题。

目测？怎么个目测法，我学习学习呗
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15楼2012-04-09 19:04:03
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
14楼: Originally posted by 黄油411 at 2012-04-09 16:27:01:
共同学习，共同进步，以后有机会再交流交流试验心得。

哈哈，有机会就交流交流吧
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Let God do with it as He wills
16楼2012-04-09 19:34:49
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kabuqinuo89: 金币+1 2012-04-10 09:46:34
就是看目的片段与marker亮度的对比，大体目测出片段浓度来，然后根据经验0.5ul的载体，加几ul的目的片段就行，TA克隆我从来不算具体体系
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17楼2012-04-10 09:22:37
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-04-10 09:22:37:
就是看目的片段与marker亮度的对比，大体目测出片段浓度来，然后根据经验0.5ul的载体，加几ul的目的片段就行，TA克隆我从来不算具体体系

哦，你好厉害啊！
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18楼2012-04-10 09:48:04
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mhmtf

铜虫 (小有名气)
应该是抗生素问题~我有一次也是全部长糊了，后来一查才知道我的抗生素要在特定的PH下面才起作用。调整好PH后就正常了~
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gdfh
19楼2012-04-18 10:31:20
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