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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么体外实验要用COS细胞系？！
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btx362237729

金虫 (正式写手)

[交流] 为什么体外实验要用COS细胞系？！ 已有1人参与

本人打算做个DNA疫苗，查了很多文献，发现体外实验检验mRNA水平的RT-PCR和蛋白质水平的western，多数是用COS-7 or COS-1细胞系做的。

这个细胞系我查了一下，貌似可以提高SV40启动子质粒的表达水平。但是可以用体外实验来代表动物模型体内的实际表达水平？

我们实验室没COS细胞系，那我可以用其他细胞系做DNA疫苗的体外实验吗，比如MCF-7？

当然也有人用DNA疫苗免疫后的动物组织做RT-PCR检查目的基因的mRNA水平，western的话都是体外吧。
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人生最黑暗的时光终于过去了
1楼 2012-04-04 19:17:03
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
具体原因我也不是很清楚
当时师姐也用的是COS7 ,原因可能是好转染，好做易于验证。
就像包病毒，一般常用3T3测滴度，用293T也可以啊。
我的个人认为。。。
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-04-04 21:15:11
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-04-04 21:15:11:
具体原因我也不是很清楚
当时师姐也用的是COS7 ,原因可能是好转染，好做易于验证。
就像包病毒，一般常用3T3测滴度，用293T也可以啊。
我的个人认为。。。

这个细胞系貌似也很好养活。。。买的话也便宜才450RMB

貌似带SV40启动子的质粒表达量会高、、、也许是这些原因吧
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人生最黑暗的时光终于过去了
3楼2012-04-05 00:43:19
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btx362237729

金虫 (正式写手)
其实我主要纠结的是  有些文献做个COS细胞的转染，发现目的基因出现在细胞溶解物或者是上清了，就不再去验证基因在动物体内是否表达了
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人生最黑暗的时光终于过去了
4楼2012-04-05 00:46:12
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btx362237729

金虫 (正式写手)
大家都做实验去了吗 没人回答
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人生最黑暗的时光终于过去了
5楼2012-04-05 10:27:05
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