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风逝zhilv

金虫 (正式写手)

[求助] NO测定

本人是新手,用RAW264.7,多次测定NO,发现NO测定结果不稳定,主要有以下几种情况:
1.96孔板中,细胞数为5000-10000时,作用18小时,基本没有任何刺激(包括模型组)产生;
2.96孔板中,细胞数为15000-25000时,作用18小时,一次结果为只有最高浓度给药组有明显刺激产生;一次结果为均产生刺激,但是颜色较浅(较同等情况下师兄做的)。
    我自己回想以下,几次试验中各种试剂配比及操作相同,细胞状态差不多,各个步骤操作也相同,惟一不同的是最后一次试验中细胞在超净台暴露时间较以往短。
    到目前自己还想不出操作中的什么原因导致结果的各般诡异,请牛牛们指点迷津!我的实验操作错误可能出在哪里?怎样避免?如何保证NO测定操的可重复性与规范性?
跪谢!!!
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